三种不同来源间充质干细胞增殖能力的比较研究

发布时间：2017-04-11 02:17

  本文关键词：三种不同来源间充质干细胞增殖能力的比较研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景及目的： 间充质干细胞已用于临床组织损伤修复、自身免疫系统及神经系统疾病的试验治疗。但是间充质干细胞的细胞数量差异及来源的不同成为制约干细胞临床应用的主要问题。虽然间充质干细胞可由多种组织获得，但是对不同来源的间充质干细胞增殖能力尚缺乏系统研究。本实验对脐带、脂肪、骨髓三种不同来源的间充质干细胞的体外扩增能力及增殖相关基因表达水平进行了较为系统的比较研究，旨在为解决临床应用间充质干细胞的来源问题提供依据。方法： 应用流式细胞术分析间充质干细胞表面标志的表达水平及诱导细胞成脂、成骨分化能力来对间充质干细胞进行鉴定；通过细胞计数、BrdU掺入实验及细胞周期分析判定细胞的增殖能力；应用实时定量RT-PCR技术分析增殖相关基因的表达水平。结果： 三种不同来源的间充质干细胞在体外培养中的传代能力有明显差别。UC-MSCs可以培养到37代，AT-MSCs可以培养到29代，而BM-MSCs只能培养到17代，细胞培养到高代次时仍表达间充质干细胞表面标志。而且UC-MSCs增殖速度在三者中为最快，AT-MSCs次之，BM-MSCs增殖速度最慢。截止细胞传至第15代的分析显示，UC-MSCs总细胞数量是AT-MSCs的1208倍，是BM-MSCs的84549倍。BrdU实验结果显示BrdU掺入量由多到少分别是UC-MSCs，AT-MSCs，BM-MSCs。细胞周期分析结果显示，UC-MSCs的增殖指数最高，AT-MSCs次之，而BM-MSCs最低。实时定量RT-PCR研究结果显示，增殖相关基因在UC-MSCs中表达量最高，其次是AT-MSCs，BM-MSCs最低。结论： 1.成功分离培养脐带、脂肪、骨髓三种不同来源的间充质干细胞。 2.脐带间充质干细胞体外长期传代能力最强，脂肪间充质干细胞次之，骨髓间充质干细胞体外长期传代能力最差。 3.三种间充质干细胞传代到高代次时，，仍然保持干细胞表面标志的表达。 4.脐带间充质干细胞生长速度快，增殖能力强，是较理想的间充质干细胞来源之一，有希望成为临床应用干细胞的主要来源。
【关键词】：间充质干细胞 细胞增殖 细胞周期 基因表达
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 英文单词缩写8-10
• 第1章 综述10-14
• 1.1 MSCs 的生物学特性10-11
• 1.2 MSCs 的功能11-12
• 1.3 MSCs 的临床应用前景12-14
• 第2章 实验部分14-34
• 第1节 间充质干细胞的分离培养及鉴定14-21
• 1 实验材料14-15
• 2 实验方法15-18
• 3 实验结果18-21
• 第2节 三种间充质干细胞的增殖能力21-34
• 1 实验材料21
• 2 实验方法21-27
• 3 实验结果27-34
• 第3章 讨论34-37
• 第4章 结论37-38
• 参考文献38-43
• 作者简介及在校期间所获科研成果43-44
• 致谢44

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