人诱导性多能干细胞体外诱导分化为造血干/祖细胞及低氧对分化过程的影响

发布时间：2021-01-26 02:41

　　背景造血干/祖细胞可重建骨髓的造血及免疫功能，在重建患者的短期造血功能及长期造血功能方面均具有明显作用。临床上造血干/祖细胞移植现在多来源于脐血，然而由于脐血的数量有限，而且存在免疫排斥的风险，因此，造血干/祖细胞的体外诱导分化提供了一种崭新的来源。诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem cell，iPS细胞）因其具有多能干细胞的特性，而且具有多种分化潜能，使其成为近年来的研究热点。iPS细胞能够在体外分化为各种体细胞，并且因为iPS细胞是自身体细胞重编程而来的，不存在免疫排斥的问题，在伦理上也更能够被大家所接受，体外诱导能够得到患者自身的造血干/祖细胞进行骨髓移植。所以如何在体外将iPS细胞高效的分化为造血干/祖细胞成为大家关注的焦点。多能干细胞已经证实可以分化为造血干/祖细胞，诱导多能干细胞分化为造血干细胞的方法目前可以分为三种：一、细胞因子单层诱导，二、iPS细胞与基质细胞共培养，三、EB（拟胚体）培养诱导分化。本实验选用的体外诱导分化体系是iPS细胞与小鼠骨髓间充质细胞OP9共培养的方法。低氧环境的存在可以调控造血相关因子的表达和分布，进而参与到后续... 

【文章来源】：济南大学山东省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
研究生导师及课题小组成员简介
摘要
ABSTRACT
主要符号表
前言
材料与方法
    1.1 主要材料仪器
    1.2 培养基和试剂的配置方法
    1.3 细胞培养
    1.4 iPS 细胞与 OP9 共培养进行造血分化
    1.5 免疫磁珠法分选 CD34+细胞
    1.6 流式细胞仪检测造血分化效率
    1.7 集落形成实验
    1.8 分离脐血 CD34+细胞
    1.9 RNA 提取和 cDNA 逆转录及 Q-PCR
    1.10 统计学处理方法
结果
    2.1 细胞的培养与形态观察
    2.2 在体外诱导 iPS 细胞向造血分化
    2.3 流式检测
    2.4 Q-PCR 检测共培养过程中各种相关基因的表达变化
    2.5 CD34+细胞集落形成实验
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读硕士学位期间的研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Expansive effects of aorta-gonad-mesonephros-derived stromal cells on hematopoietic stem cells from embryonic stem cells[J]. FU Jin-rong, LIU Wen-li, ZHOU Yu-feng, ZHOU Jian-feng, SUN Han-ying, LUO Li, ZHANG Heng and XU Hui-zhen Department of Hematology, Tongji Hospital, Tongji Medical School, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China.  Chinese Medical Journal. 2005(23)
[2]CD34分子及其单克隆抗体应用[J]. 任素萍,奚永志.  中国输血杂志. 2003(05)



本文编号：3000325