人类新基因MAGE-H1/Apr-1与APMCF1结构与功能的的初步研究

发布时间：2021-01-27 11:34

　　随着人类基因组计划的顺利完成，解读基因编码并研究相关基因的功能正成为各国科学家主要的研究方向。目前，在基因功能的研究方面主要包括：基因生物信息学分析、基因表达图谱建立、酵母双杂交系统的应用、基因转染技术、转基因动物和基因剔除技术以及新近发展的RNA干涉技术等。MAGE-H1／Apr-1与APMCF1分别是在凋亡的人白血病细胞系HL-60和人乳腺癌细胞系MCF-7中发现的人类未知功能基因，在本研究工作中，我们克隆了这两个基因并对其结构与功能进行了初步的研究和分析。 一．MAGE-H1／Apr-1结构与功能的初步研究 提取了维甲酸诱导凋亡后的HL-60细胞的总RNA，根据MAGE-H1／Apr-1的cDNA序列设计引物，运用RT-PCR技术扩增出MAGE-H1／Apr-1的开放读框序列并测序。随后，利用生物信息学方法分析了MAGE-H1／Apr-1的蛋白质序列的保守结构域，发现它共有两个MAGE家族结构域，与MAGE家族的A1、B1、C1、D1和Necdin存在较高同源性；在基因进化上，其结构更加近似于MAGE-D1和Necdin，可能是Ⅱ类MAGE家族基因的一个成员。进一步在... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：103 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

MAGE一HI与其它MAGE家族成员蛋白编码序列的排列比较

与其它种属sRp蛋白编码序列的排列比较.深灰色的背景致的氨基酸。灰色区域代表不同成员之间序列的保守区域encealignmentof砂MCFIwththeProteinfromotherSPeeshowsidentitywithatIeasefivealignedresiduesindifferenrePresentsthesequeneeeonservedamongdifferentsPeeies.读框序列的克隆及测序APMcFI开放读框序列为847bP，1.2%琼脂果与预测的的APMCF编码序列完全一致.FI重组融合蛋白表达质粒的构建与鉴定1BamHx和Sall双酶切后可见816bp片融合蛋白的诱导表达与纯化MCFI重组表达载体转化的大肠杆菌DH5a检测可见几介为56000的GST-APMCFI0)，表达的目的蛋白主要位于包涵体沉淀后，以GST琼脂糖亲和层析纯化目的蛋白，

【参考文献】：
期刊论文
[1]改良消减杂交法克隆人乳腺癌MCF-7细胞凋亡相关基因[J]. 晏伟,李青,朱峰,岳文,柴玉波,王成济,路凡,赵忠良.  中华肿瘤杂志. 2001(03)
[2]人X染色体含有一个黑色素瘤抗原基因亚家族[J]. 张成岗,邢桂春,魏汉东,鱼咏涛,贺福初.  遗传学报. 2001(03)
[3]克隆MCF-7细胞凋亡差异表达基因的一种方法[J]. 晏伟,朱峰,赵忠良,柴玉波,岳文,邵晨,路凡,李青,王成济.  细胞与分子免疫学杂志. 2001(01)



本文编号：3002979