不同低氧浓度对人脐带间充质干细胞向神经细胞分化的影响

发布时间：2021-01-28 22:03

　　目的探讨不同低氧浓度对人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）诱导分化成神经细胞的促进作用。方法hUCMSCs分为对照组（常氧浓度）和实验组（5%氧浓度组、10%氧浓度组）。MTT法检测细胞增殖;乳酸脱氢酶（LDH）法检测细胞损伤;流式细胞仪检测细胞凋亡; Weston Blot检测细胞神经生长因子（NGF）、神经巢蛋白（Nestin）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达。结果 hUCMSCs细胞在缺氧条件下细胞增殖受到抑制,培养24 h内实验组OD值显著低于对照组（P <0. 05）,随着培养时间的延长,实验组细胞增殖加快,到培养至96 h时实验组与对照组比较差异无统计学意义（P> 0. 05）。在培养24、48 h时,实验组hUCMSCs细胞LDH活性显著高于对照组（P <0. 05）;培养至72 h后5%氧浓度组LDH活性显著高于对照组（P <0. 05）,10%氧浓度组与对照组比较差异无统计学意义（P>0. 05）;培养至96 h后各组hUCMSCs细胞LDH的活性比较差异无统计学意义（P> 0. 05）。5%氧浓度组hUCMSCs细胞抗凋亡作... 

【文章来源】：解放军医药杂志. 2019,31(08)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

各组人脐带间充质干细胞培养96h后凋亡细胞率对照组10%氧浓度组5%氧浓度组

96h后hUCMSCs细胞经流式细胞仪检测，各组凋亡细胞率比较差异无统计学意义(P＞0．05)。见图1。1%低氧培养12h时诱导hUCMSCs凋亡，5%氧浓度组、10%氧浓度组凋亡细胞率低于对照组(P＜0．05);缺氧培养的实验组(5%氧浓度组、10%氧浓度组)细胞具有抗细胞凋亡作用，5%氧浓度组抗凋亡作用强于10%氧浓度组(P＜0．05)。见图2。对照组10%氧浓度组5%氧浓度组96%h图1各组人脐带间充质干细胞培养96h后凋亡细胞率诱导凋亡对照组10%氧浓度组5%氧浓度组图2各组人脐带间充质干细胞诱导凋亡后凋亡细胞率2.4神经细胞诱导分化加入成神经细胞诱导培养的第3天，5%低氧培养组的hUCMSCs细胞增殖·8·解放军医药杂志2019年8月第31卷第8期Med＆PharmJChinPLA，Vol．31，No．8，August．2019

质收缩，折光性增强。10%低氧培养组和对照组的hUCMSCs细胞未见明显异常。诱导培养的第5天，5%低氧培养组hUCMSCs细胞为长梭形，胞质和胞核偏向细胞一侧，有双极或多极突起，突起细而长，末端分叉，具有典型的神经元样形态;有少量hUCMSCs细胞死亡，脱落呈圆球型的漂浮细胞。10%低氧培养组hUC-MSCs细胞形态开始发生变化，胞质收缩。对照组hUCMSCs细胞形态未见明显异常，但细胞开始呈分散状态生长。见图3。诱导培养第3天诱导培养第5天对照组10%氧浓度组5%氧浓度组图3各组人脐带间充质干细胞成神经诱导后细胞形态变化2.5各组hUCMSCs中神经元相关蛋白的表达成神经诱导第5天时，5%氧浓度组和10%氧浓度组hUCMSCs细胞中NGF、Nestin、NSE的表达显著高于对照组(P＜0．05)。见图4。240%KD140%KD78%KD42%KDNestinNGFNSEActin对照组5%氧浓度组10%氧浓度组图4各组人脐带间充质干细胞细胞神经元相关蛋白的表达检测NGF为神经生长因子，NSE为神经元特异性烯醇化酶，Nestin为神经巢蛋白3讨论hUCMSCs是一种存于胚胎组织废弃物———脐带华通胶中的干细胞，来源于发育早期由中胚层，形态和生物学特性与骨髓间充质干细胞相似，可以跨胚层诱导分化为骨、软骨、真皮组织、骨骼肌、心肌细胞及神经元等多种类型细胞［5-6］，在组织再生和创伤修复等方面具有重要作用。目前国内外多家干细胞治疗中心已开展了hUCMSCs治疗帕金森病、脊髓损伤、脑瘫、多发性硬化、老年痴呆、脊髓小脑共济失调等神经系统疾病的临床研究。在正常的生理状态下，人体大部分组织

【参考文献】：
期刊论文
[1]palliative care and end-stage colorectal cancer management:The surgeon meets the oncologist[J]. Renato Costi,Francesco Leonardi,Daniele Zanoni,Vincenzo Violi,Luigi Roncoroni.  World Journal of Gastroenterology. 2014(24)
[2]人脐带间充质干细胞体外培养、鉴定及其诱导分化的研究[J]. 王晓辉,惠玲,杨霄鹏,王鲲,杨雯,哈小琴.  解放军医药杂志. 2013(10)



本文编号：3005772