异体反应性NK细胞诱导供者特异性耐受的作用机理初探
发布时间:2021-01-30 11:53
目的:探讨异体反应性NK细胞在非清髓骨髓移植中诱导供者特异性耐受的作用机理。方法:以近交系C57BL/6J(H-2Db)雌鼠为受鼠,C57BL/6J×BALB/c杂交F1代(H2Db/d)雌鼠为供鼠,以氟达拉滨与环磷酰胺为移植前的非清髓化疗方案,进行H-2单倍体骨髓移植。应用高强度磁珠分选系统纯化供鼠NK细胞亚群。分选前后NK细胞的纯度用流式细胞仪检测;采用LDH释放法检测磁珠分选后的NK细胞对Yac-1淋巴瘤细胞、自体及异体淋巴细胞的杀伤。按照对C57小鼠预处理条件的不同分为两组:A组先行化疗预处理,再行骨髓移植;B组行化疗预处理后,输注供鼠NK细胞的同时行骨髓移植。用流式细胞仪检测移植后90天内A、B两组小鼠脾脏和骨髓中H-2Dd细胞比例,检测供体嵌合情况;以F1代小鼠脾细胞作为刺激细胞,移植后7天、14天、21天、28天的两组小鼠及正常C57小鼠的脾细胞作为效应细胞行单向混合淋巴细胞培养;以F1代小鼠脾细胞作为刺激细胞,以正常C57小鼠的脾细胞作为效应细胞,并分别加入移植后23天A组和B组的不...
【文章来源】:天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】:74 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
Fl供鼠来源异体反应性NK细胞的流式检测
弧一汤-一一一-一,~一~~-一启一欢怕洲川斗.洲翔钊刘叫才魂﹃公带会r.巴﹁…!,.一爵杯-价性时飞一豁产闷‘口价幼斌落。士作训,,.哥孚二几几~~~!!!翩砂:,;;;科习2.7%哎公的麟乞__,、点!!父龟卿!梦蓝幻O之勺妙气r)辫勺l{只,_,介‘愁介乙A.B.图1Fl供鼠来源异体反应性NK细胞的流式检测A.FI供鼠的脾脏细胞散点图;B.FI供鼠脾细胞中能特异性识别并杀伤C57细胞的Ly49A+NK细胞亚群(Allo一NK细胞);
小鼠淋巴细胞无杀伤活性。3、移植后不同时间点骨髓、脾脏供体细胞嵌合率的比较移植后3个月内脾脏与骨髓供体细胞的嵌合率检测如表1、表2及图3、图4所示,化疗组与化疗加NK组脾脏中的嵌合率在移植后第7天及21天以后的两个月内比较有统计学差异,尸<0.05,在三个月的时候仍有差别;化疗组和化疗加NK组之间骨髓中的嵌合率在2个月内比较有统计学差异,P<0.05,而在三个月的时候没有差别。此差异表现为无论在脾脏还是骨髓,化疗加NK组中供体的细胞比例均高于化疗组。表1移植后不同时间点脾脏中供体细胞嵌合率的比较(x幻,%)化疗组化疗加NK组 21.90士3.10 18.60士3.89 1.40士0.43 7.50士0.70 9.36士3
【参考文献】:
期刊论文
[1]低剂量氟达拉滨、环磷酰胺联合供者NK细胞作为非清髓性预处理用于小鼠单倍相合造血干细胞移植[J]. 于津浦,曹水,辛宁,安秀梅,齐静,任秀宝. 中国实验血液学杂志. 2007(05)
[2]树突状细胞与移植免疫[J]. 杜隽铭,全志伟,单根法. 肝脏. 2004(02)
[3]TGF-β1基因转染对大鼠树突状细胞生物学特性的影响[J]. 王云甫,孙圣刚,曹学兵,杨敬宁,吴雄文,朱红灿. 免疫学杂志. 2004(01)
本文编号:3008852
【文章来源】:天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】:74 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
Fl供鼠来源异体反应性NK细胞的流式检测
弧一汤-一一一-一,~一~~-一启一欢怕洲川斗.洲翔钊刘叫才魂﹃公带会r.巴﹁…!,.一爵杯-价性时飞一豁产闷‘口价幼斌落。士作训,,.哥孚二几几~~~!!!翩砂:,;;;科习2.7%哎公的麟乞__,、点!!父龟卿!梦蓝幻O之勺妙气r)辫勺l{只,_,介‘愁介乙A.B.图1Fl供鼠来源异体反应性NK细胞的流式检测A.FI供鼠的脾脏细胞散点图;B.FI供鼠脾细胞中能特异性识别并杀伤C57细胞的Ly49A+NK细胞亚群(Allo一NK细胞);
小鼠淋巴细胞无杀伤活性。3、移植后不同时间点骨髓、脾脏供体细胞嵌合率的比较移植后3个月内脾脏与骨髓供体细胞的嵌合率检测如表1、表2及图3、图4所示,化疗组与化疗加NK组脾脏中的嵌合率在移植后第7天及21天以后的两个月内比较有统计学差异,尸<0.05,在三个月的时候仍有差别;化疗组和化疗加NK组之间骨髓中的嵌合率在2个月内比较有统计学差异,P<0.05,而在三个月的时候没有差别。此差异表现为无论在脾脏还是骨髓,化疗加NK组中供体的细胞比例均高于化疗组。表1移植后不同时间点脾脏中供体细胞嵌合率的比较(x幻,%)化疗组化疗加NK组 21.90士3.10 18.60士3.89 1.40士0.43 7.50士0.70 9.36士3
【参考文献】:
期刊论文
[1]低剂量氟达拉滨、环磷酰胺联合供者NK细胞作为非清髓性预处理用于小鼠单倍相合造血干细胞移植[J]. 于津浦,曹水,辛宁,安秀梅,齐静,任秀宝. 中国实验血液学杂志. 2007(05)
[2]树突状细胞与移植免疫[J]. 杜隽铭,全志伟,单根法. 肝脏. 2004(02)
[3]TGF-β1基因转染对大鼠树突状细胞生物学特性的影响[J]. 王云甫,孙圣刚,曹学兵,杨敬宁,吴雄文,朱红灿. 免疫学杂志. 2004(01)
本文编号:3008852
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