O型FMDV复合表位/CTB重组枯草芽孢杆菌构建与实验免疫

发布时间：2021-02-07 06:41

　　在分析FMDV抗原表位和免疫特性的基础上,结合FMD的流行特点,设计了O型FMDV复合表位与CTB的融合基因CTB-Th2-VP1和CTB-VP1-2A-Epi,将其克隆入表达载体pGEX-6P-1,在BL21中获得诱导表达,表达的融合蛋白以包涵体形式存在,具有O型FMDV和CTB双重反应原性。融合蛋白复性后具有CTB的生物活性,腹腔接种小鼠后可诱导产生特异性的体液、细胞和黏膜免疫,其中CTB-VP1-2A-Epi融合蛋白产生的免疫水平高于或接近灭活疫苗。将CTB-VP1-2A-Epi融合基因克隆到枯草芽孢杆菌表达载体pBC38C中,构建了CTB-VP1-2A-Epi重组枯草芽孢杆菌,免疫小鼠可产生O型FMDV特异性的细胞免疫和黏膜免疫。将重组枯草芽孢杆菌与重组鸡痘病毒vUTAL3CP1、核酸疫苗pIRES3CP1及O型FMDV灭活苗以不同的组合方式联合免疫小鼠。结果显示,重组枯草芽孢杆菌能够增强这三种疫苗的免疫效果,其中以核酸疫苗首免、重组鸡痘病毒加强免疫,结合重组枯草芽孢杆菌灌服的免疫策略的免疫效果最佳,可诱导机体产生较高水平的细胞免疫、体液免疫和黏膜免疫。研究结果表明设计和表达的... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：201 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
提要
引言
第一篇 文献综述
    第一章 动物新型疫苗研究进展
        1 现代分子生物学技术与新型疫苗研究
        2 新型免疫原与疫苗
        3 载体与疫苗
        4 结语
    第二章 霍乱毒素研究进展
        1 CT 的结构特性
        2 CTB 黏膜免疫佐剂研究
        3 小结
    第三章 口蹄疫疫苗研究进展
        1 口蹄疫传统疫苗研究
        2 口蹄疫新型疫苗研究
        3 展望
第二篇 研究内容
    第一章 O 型FMDV 复合表位与CTB 融合基因的分子设计
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        4 小结
    第二章 O 型FMDV 复合表位与CTB 融合基因的构建与表达
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        4 小结
    第三章 O 型FMDV 复合表位与CTB 融合蛋白的实验免疫
        1 材料和方法
        2 结果
        3 讨论
        4 小结
    第四章 O 型FMDV 复合表位/CTB 重组枯草芽孢杆菌 构建与实验免疫
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        4 小结
    第五章 O 型FMDV 复合表位/CTB 重组枯草芽孢杆菌 与多种FMDV 基因重组体联合实验免疫
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        4 小结
    结论
参考文献
博士期间发表论文
中文摘要
Abstract
致谢
导师简介
作者简介
CURRICULUM VITAE


【参考文献】：
期刊论文
[1]绿色荧光蛋白基因在枯草芽孢杆菌中的表达[J]. 陈晓月,金宁一,海洋,邹伟,马海利,李昌.  中国生物制品学杂志. 2008(02)
[2]口蹄疫病毒复合多表位DNA疫苗的设计及构建[J]. 马鸣潇,金宁一,刘慧娟,鲁会军,田明尧,金明兰,沈国顺,张林,李旭,计越,金扩世.  中国生物制品学杂志. 2007(03)
[3]流感复合多表位疫苗的设计及小鼠免疫研究[J]. 贾雷立,金宁一,鲁会军,金洪涛,王瑞琳,田明尧,陈义峰,郑敏,李昌,李霄,马明潇,金扩世.  广西农业生物科学. 2006(S1)
[4]以乳酸杆菌为载体的口蹄疫病毒VP1基因DNA疫苗猪体免疫试验[J]. 李云岗,田夫林,王会波,马慧玲,陈静,李新生,高凤山,夏春.  中国兽医科学. 2006(08)
[5]口蹄疫病毒重组鸡痘病毒活载体疫苗和DNA疫苗免疫牛的试验研究[J]. 郑敏,金宁一,秦晓冰,金扩世,刘棋,田明尧,郭建顺,徐敬龙,李昌.  畜牧兽医学报. 2006(02)
[6]口蹄疫抗原决定簇融合基因转化水稻的研究[J]. 倪志华,张红心,王鸣刚,陈亮.  厦门大学学报(自然科学版). 2005(S1)
[7]口蹄疫抗原决定簇融合基因转化胡萝卜的研究[J]. 李文建,沈明山,李春江,陈亮.  厦门大学学报(自然科学版). 2005(S1)
[8]O型口蹄疫病毒VP1嵌合基因的构建及原核表达[J]. 郑敏,金宁一,鲁会军,韩松,金扩世,李昌.  中国兽医学报. 2005(06)
[9]共表达口蹄疫病毒衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因重组鸡痘病毒的构建及其免疫原性[J]. 金宁一,张洪勇,尹革芬,郑敏,刘彤,江文正,李子健.  科学通报. 2004(06)
[10]PELA microspheres loaded H.pylori lysates and their mucosal immune response[J]. Jian-Min Ren Quan-Ming Zou Fu-Kun Wang Wen-Knn Zen,Faculty of Medical Laboratory Science,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China Qiang He Wei Chen,Department of Radiology,southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China.  World Journal of Gastroenterology. 2002(06)



本文编号：3021840