极低频电磁场下脾脏淋巴细胞的变化
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【摘要】:随着科学技术迅速发展的今天,电磁辐射与我们的关系越来越紧密。我们日常生活接触到的最多的一类电磁辐射就是极低频电磁场辐射。脾脏作为机体最大的外周免疫器官,也是产生淋巴细胞和淋巴细胞聚集的主要场所,并且在机体的免疫反应中发挥着重大的作用。所以,本次课题研究的目的是探索极低频电磁场辐射对小鼠脾脏淋巴细胞的影响,从而揭示电磁辐射对机体免疫系统的影响。 在实验过程中,我们将45只昆明种小鼠用完全随机的方法分成3组,每组15只。分别用极低频交变电磁场(0.05mT,50Hz)和极低频脉冲磁场(0.1mT,50Hz,脉冲间隔15s)作用于小鼠,每天作用5小时并对小鼠进行为表观观察。6周后处死小鼠,无菌条件下取小鼠脾脏,称取小鼠脾脏湿重。计算小鼠的脾脏指数。将小鼠脾脏磨碎,经过3次离心洗涤后,用RPMI-1640培养液培养细胞,将制成脾细胞悬液分装到96孔培养板中。将培养板在CO培养箱内培养72小时,培养结束前4小时,取出培养板,加入MTT溶液,继续培养4小时。培养结束后,取出培养板,加入二甲基亚砜,,经充分震荡后,用分光光度计测定吸光值。另分装脾细胞悬液至5个96孔培养板中,每天取出一个培养板,测定吸光值并进行细胞计数,分别用MTT法和细胞计数法绘制细胞生长曲线。 实验结果表明实验选取的极低频交变电磁场对小鼠体重增加值的增加具有一定的促进作用。实验选取的交变电磁场对小鼠脾脏指数的增加和淋巴细胞增殖能力的提高均具有一定的促进作用,实验选取的脉冲电磁场对小鼠脾脏指数的增加具有一定的促进作用。在淋巴细胞生长曲线上可以看出交变电磁场对淋巴细胞增殖能力的促进作用会随着细胞培养时间的增加而减弱。
【关键词】:极低频电磁场 免疫功能 淋巴细胞
【学位授予单位】:沈阳工业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R392
【目录】:
- 摘要5-6
- Abstract6-11
- 第一章 绪论11-19
- 1.1 研究背景11-12
- 1.2 研究现状12-16
- 1.2.1 电磁场对免疫细胞增殖分化影响的研究12-13
- 1.2.2 电磁场对免疫细胞凋亡影响的研究13-14
- 1.2.3 电磁场对免疫细胞自由基影响的研究14
- 1.2.4 电磁场对免疫细胞及细胞因子活性影响的研究14-15
- 1.2.5 电磁场对免疫系统遗传学影响的研究15-16
- 1.2.6 电磁场对免疫系统宏观影响的研究16
- 1.3 研究现状中存在的问题及解决办法16-17
- 1.4 课题研究的目的及意义17
- 1.5 课题研究的主要内容17-19
- 第二章 材料与方法19-36
- 2.1 实验材料19-25
- 2.1.1 实验试剂及材料19
- 2.1.2 实验试剂配置19-21
- 2.1.3 实验仪器21-22
- 2.1.4 磁场发生装置22-24
- 2.1.5 实验动物24-25
- 2.2 预实验25-26
- 2.3 实验分组及辐射安排26-27
- 2.4 行为表观观察27
- 2.5 脾脏指数实验27-28
- 2.5.1 实验过程27-28
- 2.5.2 脾脏指数计算28
- 2.6 淋巴细胞增殖实验28-33
- 2.6.1 淋巴细胞悬液制备28-29
- 2.6.2 淋巴细胞计数29-31
- 2.6.3 MTT 比色法原理及注意事项31-32
- 2.6.4 细胞培养32-33
- 2.6.5 测定吸光值33
- 2.7 细胞生长曲线实验33-36
- 2.7.1 MTT 法绘制细胞生长曲线34
- 2.7.2 细胞计数法绘制细胞生长曲线34-35
- 2.7.3 两种方法比较的优缺点35-36
- 第三章 实验结果36-47
- 3.1 统计学计算36
- 3.2 预实验结果36-37
- 3.3 行为表观观察结果37-38
- 3.4 脾脏指数结果38-40
- 3.4.1 交变磁场组实验结果38-39
- 3.4.2 脉冲磁场组实验结果39-40
- 3.5 细胞增殖测定结果40-42
- 3.5.1 交变磁场组实验结果40-41
- 3.5.2 脉冲磁场组实验结果41-42
- 3.6 MTT 法绘制细胞生长曲线结果42-44
- 3.6.1 交变磁场组实验结果42-43
- 3.6.2 脉冲磁场组实验结果43-44
- 3.7 细胞计数法绘制细胞生长曲线结果44-47
- 3.7.1 交变磁场组实验结果44-45
- 3.7.2 脉冲磁场组实验结果45-47
- 第四章 结论47-51
- 4.1 行为外观观察结论47
- 4.2 脾脏指数结论47-48
- 4.3 细胞增殖结论48
- 4.4 细胞生长曲线结论48-49
- 4.5 本章小结49-51
- 参考文献51-54
- 在学研究成果54-55
- 致谢55
【参考文献】
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