人胎盘间充质干细胞的分离鉴定及其对脐血造血干/祖细胞体外扩增的支持作用

发布时间：2021-03-13 14:48

　　除造血干细胞外，骨髓中还存在极少量的间充质干细胞（MSC），在体外特定的培养条件下可以大量扩增，并保持其向骨、软骨、脂肪、腱、肌肉、神经及基质细胞等组织的多向分化能力。MSC 的自我更新能力和多向分化能力，使其在临床上具有巨大的治疗潜力。MSC 易于外源基因的转染和表达，MSC 携带的外源基因表达具有组织特异性，可定位于缺陷组织，如对某种基因突变所致遗传病，可分离自体 MSC，体外进行改造，敲除突变基因，导入正常基因，再回输体内。 此外，MSC 通过分泌可溶性分子如 TGF-β、HGF 及细胞间接触抑制细胞或有丝分裂原引起的 T 细胞增殖，且这种抑制效果随着 MSC 参入量的增多而增强。但MSC 并不诱导 T 细胞的凋亡及无能，去除 MSC 后 T 细胞经再次刺激还可增殖。 MSC 作为骨髓基质细胞的前体细胞，除可形成骨髓微环境外，还同基质细胞一样，表达多种造血相关因子。体外以 MSC 为滋养层短期培养可促进 HSPC 扩增，长期培养可以支持 LTC-IC。体内 MSC 具有改善骨髓微环境，促进造血重建的作用，肿瘤患者接受大剂量化疗后，进行自体 CD34＋细胞联合自体 MS... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

经密度梯度离心分离胎盘贴壁细胞形态特点

26图 1-2. 胎盘贴壁细胞组织化学染色。ACP、SB 阴性（A、B），ALP 约 5%弱阳性（C），ANAE 阳性（D），PAS 强阳性（E）。3． 胎盘 MSC 免疫组化染色胎盘 MSC 表达多种粘附分子，E-Cadherin、Desmin、Vimentin、Fibronectin、Laminin 阳性，Smooth Musle Actin 阴性，vWF 阴性。4． 胎盘 MSC 表面标志流式动态结果流式细胞仪检测细胞表面标志，动态观察第 3、6、9、12、15 代细胞，无明显改变。不表达造血细胞表面标志即 CD34（HSPC 及内皮细胞阳性）、CD45（白细胞阳性），HLA-DR（MHC-II 类分子）持续阴性，CD29和 CD44（纤维蛋白和透明脂酸盐的受体，基质细胞表达），CD73（即 SH-3、

图 1-3. 流式细胞术检测胎盘贴壁细胞表型。CD29、CD44、CD73（SH-3，4）、CD105（SH-2）、CD166、HLA-ABC、UEA-1 阳性，CD35、CD45、HLA-DR 阴性。表 1-1：流式细胞术动态检测胎盘 MSC 表面标志（%）CD29 CD34 CD44 CD45 CD73 CD105 CD166 HLA-ABC HLA-DR UEA-1第3代 95.1 1.80 94.7 0.80 98.2 96.6 92.7 95.3 1.10 94.5第6代 96.3 1.25 95.3 1.73 95.2 92.8 93.6 96.9 0.93 97.0第9代 95.7 2.25 94.6 1.44 96.1 93.3 91.8 95.7 1.19 91.8第12代 93.6 0.39 96.8 1.09 95.6 91.2 93.8 97.1 0.67 95.4第15代 92.1 0.49 95.4 1.21 98.0 91.9 95.6 94.3 0.82 98.1


本文编号：3080415