基于单分子/单颗粒技术的均相免疫分析新方法研究

发布时间：2021-03-16 11:30

　　免疫分析是利用抗原与抗体之间的高特异性反应实现对抗体、抗原或相关物质进行检测的分析方法。免疫分析是一种非常重要的生物分析方法,它被广泛地应用于临床诊断、食品和环境分析、生物及医学研究等领域。目前免疫分析主要以微孔板为实验平台的异相分析模式。这种方法需要抗体的包埋,缓慢的异相免疫反应,多次耗时的冲洗,酶放大反应和离线检测分析等步骤。因此,这种方法操作繁琐、分析时间长、不能满足某些快速检测和诊断的要求。均相免疫分析不需要分离,能够直接测定免疫反应混合体系中的待测物（抗体或者抗原）。这种方法通常快速,而且很容易实现微型化和自动化。目前某些检测方法如荧光偏振、荧光共振能量转移、生物发光能量转移被用于均相免疫分析。然而,由于这些检测方法的灵敏度较低,不能满足临床检测的要求。本论文旨在基于单分子和单颗粒技术,发展高灵敏的均相免疫新方法,用于肿瘤标志物的分析。主要研究工作包括如下几个方面:1)基于荧光自相关光谱和互相关光谱,发展了均相免疫分析方法。为了克服荧光相关光谱在研究分子间相互作用时,需要分子量相差4倍的限制,本文构思了两个策略,即采用荧光交叉相关光谱系统和减小抗原分子的分子量。首先,我们构建... 

【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：146 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

单通道PDMS/盖玻片杂合型芯片示意图

nm 的氦-氖激光经一双色镜(650DRLP，Omega 光焦 (UplanApo，60 × NA1.2，Olympus，Japan) m 的盖玻片上或注入于制作好的微流控芯片中。针孔后由雪崩式光电二极管(SPCM-AQR14，Perk的信号由一实时数字收集器(Flex02-12D/C，美 s，时间间隔为1 ms。视频由EMCCD拍摄得到，图为 7.4 × 7.4 μm2。

察物镜在通道内部的聚焦情况。一般实验前先将微流控芯片固定在荧光相关光的二维操作平台上，初步调节物镜的焦点与通道的位置。然后打开 CCD 视频统精细地调节焦点在通道中的位置。再向通道中注入待测溶液，利用荧光相关统的检测系统，调节物镜高度使物镜焦点准确的聚焦在通道内部。此时，一般关光谱系统的检测系统得到 Count Rate 具有最大值。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3085966