miR-93-5p靶向调控Smad5表达抑制小鼠C3H10T1/2细胞成骨分化的研究

发布时间：2021-03-17 09:39

　　目的探讨mi R-93-5p是否通过靶向调控其预测靶基因Smad5的表达,从而抑制小鼠MSCs C3H10T1/2细胞的成骨分化。方法构建Smad5 3’-UTR-荧光素酶报告载体（pmi R-RB-REPORTTM）,通过双荧光素酶报告基因检测,观察mi R-93-5p对Smad5 3’-UTR荧光素酶活性的影响,鉴定Smad5是否为mi R-93-5p的靶基因。将mi R-93-5p mimics（M组）与mi R-93-5p inhibitor（In组）及其对应的阴性对照组mi R-93-5p mimics阴性对照（MC组）与mi R-93-5p inhibitor阴性对照（In C组）分别转染至C3H10T1/2细胞中,并进行成骨诱导培养,48 h后分别采用实时荧光定量PCR（real-time fluorescent quantitative PCR,q RT-PCR）及Western blot检测各组细胞Smad5在m RNA及蛋白水平的相对表达量;14 d后通过茜素红染色检测各组细胞外钙盐的沉积情况,了解mi R-93-5p对C3H10T1/2细胞成骨分化的调控效应。结果... 

【文章来源】：中国修复重建外科杂志. 2015,29(10)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1材料与方法
    1.1主要试剂及仪器
    1.2细胞培养与成骨诱导分化实验
    1.3靶基因鉴定实验
    1.4功能验证实验
    1.5统计学方法
2结果
    2.1C3H10T1/2细胞成骨诱导效果检测
    2.2靶基因鉴定
    2.3功能验证实验
3讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]调控成骨细胞分化及骨形成关键信号通路的研究进展[J]. 徐练,孔清泉.  中国修复重建外科杂志. 2014(12)
[2]小鼠干细胞成骨和成软骨分化特异性微小RNA的初步研究[J]. 幸嵘,孔清泉,项舟,杨婧,罗静聪,邓力,解慧琪.  中国修复重建外科杂志. 2014(08)
[3]The Functions of MicroRNAs and Long Non-coding RNAs in Embryonic and Induced Pluripotent Stem Cells[J]. Wenwen Jia,Wen Chen,Jiuhong Kang.  Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2013(05)
[4]微小RNA-451靶向调节钙结合蛋白39对MSCs成骨分化的促进效应[J]. 康夏,康菲,杨波,郭洪峰,权毅,董世武.  中国修复重建外科杂志. 2013(09)



本文编号：3086946