来源于人胚纹状体区神经干/祖细胞的培养、冻存及鉴定

发布时间：2021-03-17 10:56

　　目的分离人胚胎纹状体组织的神经干/祖细胞,运用细胞培养上清液作为冻存液和贴壁法培养扩增、合理的冻存密度及有效的复苏时间,在体外建立稳定培养、保存体系,给中枢神经系统疾病的治疗提供技术支持。方法将来源于胚胎的纹状体神经干/祖细胞,利用无血清培养基进行体外培养扩增。采用细胞培养上清液作为冻存液,冻存密度为5×10⁶/ml²⁵×10⁷/ml,分别复苏冻存1、3、6个月的细胞各3支,并用台盼蓝染色计数,计算细胞存活率。将此细胞传代培养p3、p9、p15、p21,用Nestin免疫组化进行化学染色鉴定。结果应用贴壁培养法细胞能够稳定传代p21以上,冻存1、3、6个月后,细胞存活率可达87%左右,仍然保持生长分化能力,Nestin表达阳性率为85%以上。结论本方法培养人胚胎纹状体神经干/祖细胞能传代扩增、低温保存,为中枢神经系统疾病细胞治疗研究提供技术依据。 

【文章来源】：解剖科学进展. 2015,21(06)

【文章页数】：3 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 组织材料
    1.2 试剂与设备
    1.3 组织处理与原代细胞培养
    1.4 细胞传代
    1.5 神经干/祖细胞的生长曲线
    1.6 神经干/祖细胞的冻存
    1.7 免疫组化化学染色鉴定
2 结果
    2.1 神经干/祖细胞的形态学观察
    2.2 神经干/祖细胞的生长曲线
    2.3 神经干/祖细胞的复苏和计数细胞存活率
    2.4 神经干/祖细胞免疫组织化学染色
3 讨论



本文编号：3087032