基于Aptamer/二氧化硅荧光纳米探针的金黄色葡萄球菌检测研究

发布时间：2021-04-01 07:18

　　金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性菌,是人类化脓感染中最常见的病原菌。美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌。近年来,很多快速、灵敏检测金黄色葡萄球菌的方法在生物医学分析领域中发挥了重要作用,尤其是一些利用抗体-抗原识别原理发展的生物传感方法,如原子力显微镜法、酶联免疫吸附法、表面等离子体共振法及荧光免疫测定法等。然而基于抗体-抗原识别原理发展的金黄色葡萄球菌生物传感方法由于抗体的难合成、不易修饰、生物活性不稳定且成本高等而导致其存在一定的局限性。核酸适配体（Aptamer）作为一种新型特异性识别分子具有高稳定性、高选择性,且稳定性好、合成简便、容易标记、适用性广等优点,为发展快速、灵敏的金黄色葡萄球菌检测方法提供了新的思路。然而目前报道的基于Aptamer特异性识别的金黄色葡萄球菌检测方法主要是电化学传感法和荧光光谱测定法,这些方法操作复杂,且不能实现高通量检测。双色流式细胞术能对细胞或者其他生物粒子进行定性、定量分析。与传统的检测方法相比,具有免洗和速度快等优点,成为当代先进的细胞、生物粒子定量分析技术之一。同时,融合介电电泳原理和微流控芯片技术发展介... 

【文章来源】：湖南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PCR法检测金黄色葡萄球菌[51】利用PCR扩增技术最大特点是DNA能在短时间内扩增大量的目标，因此具

1.2.3抗原抗体识别法抗体指机体的免疫系统在抗原的刺激下，由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的装细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白，即所有抗体都是免疫球蛋白。利用该抗体-抗原的识别，许多生物传感方法已被开发用于病原菌的检测，包括原子力显微镜测量[57]，酶联免疫吸附试验[58],表面等离子体共振[59]，基于突光免疫测定法[69]，电化学传感[61]等等，虽然对细菌检测的抗原-抗体检测体系不需要提取DNA或破裂细胞，但因抗体由蛋白质组成，存在不易合成、稳定性差、成本高、易分解等缺点，因而限制了其广泛应用。此外，抗体分子识别研究需要建立一个多层次、多角度和系统的抗体研究平台[62]。抗体分子与抗原分子在特定片段、特定位置之间的互相吻合和匹配的过程叫免疫识别和结合。抗体-抗原特异性相互作用完全基于一级序列折叠后的三级结构，对应的蛋白质空间结构特征揭示了该特异性分子识别机制[63]。

图1.3Aptamer探针用于生物传感器检测核酸序列[73】已成功蹄选出越来越多病原菌的Aptamer，如金黄色葡萄球菌、大肠a、沙门氏菌等[78]，为发展基于Aptamer识别的病原菌微生物检测技术的基础。2009年，Shao等人蹄选得到了金黄色葡萄球菌的Aptamer[79]，种新的金黄色葡萄球菌识别分子，并且初步用于金黄色葡萄球菌成像术研究。然而，到目前为止，利用Aptamer特异性识别检测金黄色葡法仍然是少见的。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3112920