构建表达Flag-GPI的重组乙型肝炎病毒载体

发布时间：2021-04-03 20:39

　　乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）是小型的嗜肝DNA病毒,能够特异性地感染人肝实质细胞。HBV的易感性可以归于多个方面,包括细胞表面的受体以及细胞内的蛋白或其他因子,目前对HBV易感性的了解还有待深入。本课题利用课题组原有的HBV 5c3c载体和糖基磷脂酰肌醇（glycosylphosphatidylinositol,GPI）的特性,构建了重组HBV载体5c3c-CD59-Flag-GPI和5c3cT-Flag-GPI,转染Huh7细胞后可以将Flag标签锚定在细胞膜上,且可利用Flag抗体通过流式细胞术对其进行分选。在回补HBV包膜蛋白的情况下,5c3cT-Flag-GPI能包装形成完整的重组HBV颗粒。本研究为后续优化重组HBV的包装效率,进而为HBV易感性研究提供工具并奠定基础。 

【文章来源】：微生物与感染. 2019,14(04)

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞系
        1.1.2 质粒
        1.1.3 仪器和试剂
        1.1.4 引物合成
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 免疫荧光
        1.2.3 流式细胞术 （针对6孔板的贴壁细胞）
        1.2.4 Southern印迹法
2 结果
    2.1 Flag-GPI表达载体的构建
    2.2 Flag-GPI的细胞表面锚定验证
    2.3 表达Flag-GPI的重组HBV具有复制能力
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]脂质筏——病原微生物出入细胞的一种门户[J]. 周一然,宋建国.  生命科学. 2004(03)



本文编号：3117046