弓形虫ROP16/GRA7复合DNA疫苗与基因佐剂B7-2对小鼠的免疫保护性研究

发布时间：2021-04-09 05:21

　　研究背景：刚地弓形虫是一种广泛寄生于人和动物有核细胞内的原虫,可引起人兽共患弓形虫病,严重威胁着人类健康和畜牧业生产。由于抗弓形虫药物不能达到理想的治疗效果,研制安全有效的疫苗来预防和控制弓形虫病成为当前的研究热点。研究目的：构建编码弓形虫棒状体蛋白ROP16和致密颗粒蛋白GRA7基因片段的DNA复合疫苗,以及能表达小鼠共刺激分子B7-2的重组质粒作为分子佐剂,免疫接种昆明小鼠,评价疫苗的保护效果,以及分子佐剂的添加对疫苗诱导的免疫应答的影响,为优化弓形虫DNA疫苗免疫效果提供新思路。研究方法：使用PCR技术分别扩增弓形虫抗原ROP16和GRA7基因以及小鼠共刺激分子B7-2基因,经TA克隆回收各目的片段,在测序正确后,亚克隆至真核表达载体pEGFP-C1中,构建重组真核表达载体pEGFP-ROP16. pEGFP-GRA7、 pEGFP-ROP16-GRA7和pEGFP-B7-2;经PCR、双酶切和测序鉴定后,瞬时转染HEK293T细胞,荧光显微镜观察、SDS-PAGE和Western blotting分析检测目的蛋白的表达情况；大量抽提重组质粒用于制备弓形虫DNA疫苗与基因佐剂B7... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
主要符号说明
前言
第一部分 弓形虫DNA疫苗与B7-2基因佐剂的构建
    一、材料
    二、方法
    三、结果
    四、讨论
第二部分 弓形虫DNA疫苗与B7-2基因佐剂的体外表达
    一、材料
    二、方法
    三、结果
    四、讨论
第三部分 弓形虫DNA疫苗及B7-2基因佐剂免疫小鼠实验
    一、材料
    二、方法
    三、结果
    四、讨论
附图
参考文献
致谢
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学位论文评阅及答辩情况表


【参考文献】：
期刊论文
[1]外源基因转染真核细胞技术的研究进展[J]. 余祖华,丁轲,程相朝,张春杰,李银聚,吴庭才.  安徽农业科学. 2008(21)



本文编号：3126999