MCFP敲除小鼠肝脏线粒体功能异常

发布时间：2021-04-17 03:04

　　目的研究线粒体载体家族蛋白（MCFP）基因敲除对小鼠肝脏线粒体功能的影响。方法利用CRISP/Cas9技术建立MCFP基因敲除小鼠模型,并检测小鼠体质量、脏器系数、血生化以及糖代谢情况。分离小鼠原代肝实质细胞检测线粒体膜电位。提取肝脏线粒体,检测三磷酸腺苷（ATP）、活性氧（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）水平,利用非变性凝胶电泳偶联凝胶内酶活染色,检测线粒体呼吸链复合体活性。结果与同窝对照小鼠相比,MCFP敲除小鼠生理指标无明显差异,但线粒体膜电位及ATP水平降低,呼吸链复合体活性下降、ROS升高、SOD活性下降、MDA含量增加。结论 MCFP基因敲除造成肝脏线粒体功能异常,提示MCFP在线粒体抗氧化损伤及合成ATP过程中发挥重要调控作用。 

【文章来源】：军事医学. 2019,43(08)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

MCFP基因敲除小鼠的鉴定

MCFP-KO小鼠体质量、脏器比及糖代谢分析（n=8)

MCFP定位于线粒体内膜，MCFP敲除是否影响肝脏线粒体功能。为此，我们首先分离了小鼠肝实质细胞，JC-1染色后流式细胞术分析线粒体膜电位的变化。结果显示，MCFP敲除后，小鼠肝实质细胞线粒体膜电位下降，并具有统计学差异（P<0.05）。由于正常的膜电位是维持线粒体氧化磷酸化、产生ATP的先决条件，故随后检测了线粒体ATP的产量。结果显示，MCFP敲除明显降低了ATP水平且具有统计学差异（P<0.05，图3）。上述结果说明，MCFP敲除破坏了线粒体膜电位，抑制了ATP产能，降低了线粒体功能。2.4 MCFP敲除小鼠肝线粒体呼吸链复合体活性下降

【参考文献】：
硕士论文
[1]基于线粒体膜间隙蛋白质相互作用网络的基因功能研究[D]. 曾志锋.中国人民解放军军事医学科学院 2009



本文编号：3142686