自身免疫调节因子对DC2.4细胞表型及功能影响的研究

发布时间：2017-04-18 18:01

  本文关键词：自身免疫调节因子对DC2.4细胞表型及功能影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：自身免疫调节因子（Autoimmune regulator，Aire）作为一种转录因子，其基因突变能够引发多器官自身免疫性疾病-APECED病。研究证实，中枢Aire通过调节mTECs上TRAs表达，清除自身反应性T细胞维持中枢免疫耐受。在外周，Aire主要表达在DC细胞上，不成熟DC能够诱导免疫耐受，也有报道称某些成熟DC也可参与诱导免疫耐受。此外，外周DC也能够表达TRAs诱导自身反应性T细胞清除或者诱导Treg的产生，维持耐受。但DC上表达的Aire功能和意义还不是很清楚，Aire是否也参与外周免疫耐受机制有待于探讨。 基于以上背景，我们推测Aire可能通过影响DC细胞表型和成熟状态，以及调节TRAs表达而参与外周免疫耐受维持。为此，，我们进行了以下几方面研究： 1.稳定转染Aire的DC2.4细胞的鉴定研究显示我们前期建立的稳定转染pEGFPC1/Aire（A1-1）、pEGFPC1（C1-1-1）质粒的DC2.4细胞株中Aire和GFP表达良好，可以用于后续实验。 2. Aire对DC2.4细胞表型的影响流式细胞术结果显示某些模式识别受体的配体处理后，A1-1组较C1-1-1组CD80、CD40、CD11c、CD83、CD86和MHC-II类分子表达降低。表明Aire能够使DC2.4维持不成熟状态。 3. Aire对DC2.4细胞增殖能力的影响细胞增殖-毒性检测测试各组细胞之间增殖能力无明显差异。表明Aire对DC2.4细胞增殖能力无影响。 4. Aire对DC2.4细胞吞噬能力的影响荧光微球吞噬实验结果显示，A1-1组较C1-1-1组细胞吞噬能力增强。表明Aire能够增强DC2.4吞噬功能，使其维持在不成熟状态。 5. Aire对DC2.4细胞TRAs表达的影响聚合酶链式反应结果显示，A1-1组细胞与C1-1-1组细胞相比，多种TRAs表达上调。提示Aire可能通过调节DC2.4上TRAs的表达参与外周耐受。 本研究发现Aire可能通过影响DC细胞表型及其吞噬能力使其维持在不成熟状态，或者通过调控外周DC上TRAs的表达，参与外周免疫耐受的维持。这有利于揭示Aire在外周免疫系统表达的功能和意义，成为该领域的一创新点。
【关键词】：Aire DC2.4 TRAs 免疫耐受
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R392
【目录】：

• 提要4-5
• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-14
• 英文缩略词14-16
• 引言16-18
• 文献综述18-28
• 一、自身免疫调节因子（Aire）的研究进展18-21
• 1. Aire 突变与 APECED 病18-19
• 2. Aire 基因的表达和分布19-20
• 3. Aire 与免疫耐受20-21
• 二、树突状细胞的生物学特征和功能21-27
• 1. 树突状细胞的发育与分类21-23
• 2. 树突状细胞的功能23-27
• 三、Aire 与树突状细胞27-28
• 课题设计思路28-30
• 实验研究30-64
• 一、材料30-36
• 1. 细胞系30
• 2. 细胞培养所需试剂和配制方法30-31
• 3. 流式细胞术使用抗体及试剂配制31-32
• 4. CCK-8 检测所需试剂32
• 5. 荧光微球吞噬检测所需试剂32
• 6. RNA 提取及 RT-PCR 所需试剂32-35
• 7. 主要仪器设备35-36
• 二、实验方法36-44
• 1. 细胞培养36-37
• 2. 流式细胞术37
• 3. CCK-8 增殖实验37-38
• 4. 荧光微球吞噬实验38
• 5. 总 RNA 的提取38-39
• 6. RT（Reverse transcription，RT）反应39
• 7. 普通 PCR 反应39-43
• 8. RT-qPCR 反应43-44
• 9. 结果统计学分析44
• 三、实验结果44-57
• 四、讨论57-61
• 五、结论61-62
• 六、有待于进一步研究的问题62-64
• 参考文献64-74
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果74-76
• 致谢76-78

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 顾春瑜,郑磊,王前;树突状细胞治疗自身免疫性疾病的机制及应用研究进展[J];现代免疫学;2005年03期

  本文关键词：自身免疫调节因子对DC2.4细胞表型及功能影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：315412