三七总皂苷对兔骨性关节炎模型软骨作用的研究

发布时间：2021-06-01 01:09

　　目的：本课题通过细胞实验观察三七总皂苷（PNS）对骨髓基质细胞（BMSCs）是否具有增殖作用。通过兔骨性关节炎（OA）模型观察在OA发生时,PNS对关节软骨是否具有保护作用。方法：1.体外实验：抽取兔BMSCs,培养至第三代,将细胞调整密度,接种至96孔板,行PNS干预,分为空白对照组、低浓度用药组、高浓度用药组。通过MTT法检测PNS对兔BMSCs增殖能力的影响。2.体内试验：选取雌性新西兰大白兔21只,随机分为3组,每组7只,A组为高浓度药物治疗组；B组为低浓度治疗组；C组为空白对照组。通过前交叉韧带切断法构建骨性关节炎模型。手术后第二周行膝关节内注射疗法治疗。治疗组注射PNS,对照组注射等量生理盐水,每周2次,每次注射剂量为每公斤体重0.1ml。第七周将两组家兔处死,通过X线和CT观察关节结构和骨赘的形成。将膝关节取下,通过印度墨水染色评价股骨髁部位软骨变化情况,分为4级。结果：经统计学处理,体外实验证明,两组细胞增殖效率有显著差异,用药组对BMSCs具有明显增殖作用（P<0.05）；体内实验证明,两组股骨髁在印度墨水染色分级上无明显差异（P>0.05）。结论：体外实... 

【文章来源】：南京中医药大学江苏省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
符号及縮略语
前言
第一部分 文献综述
    1. OA发病机制的中西医研究进展
        1.1 OA的流行病学
        1.2 OA的致病因素
        1.3 OA的病理学改变
        1.4 中医对OA发病的认识
        1.5 小结与展望
    2. 植物化合物对软骨的保护作用研究进展
        2.1 促进成软骨分化
        2.2 抑制关节软骨降解
        2.3 抑制金属蛋白酶活性
        2.4 抑制软骨肉瘤
        2.5 结语与展望
    3. 三七活性成分对运动系统作用研究进展
        3.1 抗炎及抗氧化作用
        3.2 保护软骨作用
        3.3 抗疲劳作用
        3.4 提高成骨分化
        3.5 促进韧带修复
        3.6 提高BMSCs的归巢
        3.7 小结与展望
第二部分 实验研究
    实验一、PNS对免BMSCs的增殖作用
        1 实验材料与设备
            1.1 实验动物
            1.2 主要药物及试剂
            1.3 主要仪器及设备
        2 实验方法
            2.1 BMSCs的分离、原代培养及传代培养
                2.1.1 准备实验材料和试剂
                2.1.2 原代BMSCs的分离、培养
                2.1.3 建立BMSCs细胞系
            2.2 MTT法检测PNS对BMSCs增殖的影响
                2.2.1 配制MTT溶液
                2.2.2 细胞接种
                2.2.3 MTT检测细胞活性及增殖
        3 统计学分析
        4 结果
    实验二、PNS对兔OA模型关节软骨的作用
        1 实验材料与设备
            1.1 实验动物
            1.2 主要试剂和药品
            1.3 主要器械和设备
        2 关节内给药治疗兔膝OA模型
            2.1 兔OA模型的构建
                2.1.1 样本分组
                2.1.2 OA模型构建
            2.2 膝关节内注射PNS
        3 影像学检查
        4 观察关节软骨表面损伤
            4.1 大体观察
            4.2 印度墨水染色
        5 统计学分析
        6 结果
            6.1 影像学检查
            6.2 软骨表面损伤评价
第三部分 讨论
第四部分 结论
参考文献
附录
攻读硕士学位期间取得的学术成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]三七总皂苷白蛋白微球注射液的初步稳定性研究[J]. 杨姗,陈汝玲,吴静澜,代政敏.  贵州科学. 2021(02)



本文编号：3209352