高氧肺损伤幼鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞蛋白质组学变化的相关研究

发布时间：2021-06-01 06:30

　　目的 通过蛋白质组学研究探讨高氧暴露后幼鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）的损伤机制。方法 将早产SD大鼠原代AECⅡ细胞分为常氧组和高氧组,分别置于常氧（21%O2）和高氧（95%O2）中培养24 h,于倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变,用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测凋亡相关蛋白Bcl-2、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）表达水平,以保证高氧模型的成功建立；收集AECⅡ细胞总蛋白,采用串联质谱标签（TMT）标记定量蛋白质组技术检测其蛋白谱,以高氧暴露后差异倍数（FC）>1.5、P<0.05双标准筛选差异蛋白,并对其进行生物信息学分析；依据分析结果,将AECⅡ细胞分为常氧组、高氧组及高氧+MW167组〔细胞置于含95%O2的氧舱前30 min加入10 μmol/L的γ泌肽酶抑制剂MW167〕,培养24 h后,用CCK-8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测细胞活性,用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）检测Notch通路下游蛋白毛状蛋白（Hes1）和促凋亡蛋白Bax的mRNA表达。结果 ①光镜下观察,常氧组细胞明显增殖、延展... 

【文章来源】：中华危重病急救医学. 2019,(04)

【文章页数】：6 页

【参考文献】：
期刊论文
[1]高氧环境下肺细胞形态及功能变化[J]. 汪娟,黄栋,莫连芹,马秀,黄颖.  中华危重病急救医学. 2018 (08)



本文编号：3209852