microRNAs在犬心衰模型中的变化及肝素对其影响的研究

发布时间：2017-04-23 05:08

  本文关键词：microRNAs在犬心衰模型中的变化及肝素对其影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景及目的：心力衰竭（心衰）是各种心血管疾病的严重阶段和发展到晚期的共同转归，心衰5年内死亡率接近50%。心力衰竭的发生机制已有研究，但对于心衰预防、早期诊断的研究仍相对较少。microRNAs（miRNAs）是一种高度保守的内源性小分子非编码RNA，在心衰发生和进展过程中在多个方面发挥着重要作用,但miRNAs能否用于心衰的预防和早期诊断目前尚没有相关研究。本研究利用右心室快速起搏制作犬心衰模型，分别检测犬左心室组织及起搏各时间点血浆中几种与心衰相关miRNAs的变化,寻找潜在的心衰生物学指标及治疗靶点。方法：采用完全随机分组设计，将12只杂种犬分为对照组与起搏组，每组6只。植入起搏器，，起搏组以240~260次/min频率刺激右心室，对照组起搏器未起搏。送回动物房饲养，每日伤口处酒精擦拭，术后3天注射抗生素，预防感染。分别于术后1天、1周、2周时用EDTA-抗凝管于前肢隐静脉取血5~6ml。在术后2周时测定犬血流动力学指标，处死取左心室心尖部组织。利用RT-qPCR的方法分别检测不同时间点血浆及左心室组织中的miR-21、miR-133a、miR-328、miR-423、miR-499的含量。 结果：起搏组与对照组相比左心室组织中的miR-328与miR-499相对表达量明显下降，其差异具有统计学意义(P0.05)；在循环血浆中，miR-21、miR-133a、miR-423a、miR-499在起搏1天时其相对表达量明显升高且具有统计学差异(P0.05)，随着起搏时间的延长，这4种miRNAs的相对表达量逐渐降低，其中miR423a、miR-499相对表达量下降明显，在起搏2周时与对照组相比其差异已无统计学意义。miR-21相对表达量下降较平缓，在起搏2周时与对照组相比其差异仍具有统计学意义(P0.05)。在循环血浆中miR-328在起搏1天时其相对表达量明显降低且具有统计学差异(P0.05)，随着起搏时间的延长，未发生明显的变化。 结论：血浆miR-328水平在本心衰模型中能够反映其在心肌组织中的变化，并且有可能成为潜在的心衰治疗靶点；miR-21、miR-133a、miR-423a、miR-499有可能成为心衰潜在的心衰生物指标。 背景及目的：随着介入治疗在心血管领域的不断开展，使得肝素成为治疗心血管疾病中应用最广泛试剂之一。既往有多篇文章报道肝素可以明显抑制PCR扩增效率，这种特性对研究miRNA与心血管疾病的关系造成巨大阻碍，所以搞清楚肝素能影响miRNA的具体范围和机制对其研究具有重要意义。在本研究中我们主要模拟介入环境观察肝素是否会对血浆和组织miRNA提取及PCR扩增效率产生影响。 方法：将杂种犬9只,雌雄不分,随机分为两组,对照组(n=5)和实验组(n=4)，实验组于右侧股静脉穿刺置管，连接内盛肝素的注射器,回抽见血后推入肝素1ml6000U，再推入肝素盐水2ml，十分钟后用更换注射器从鞘管内抽取静脉血10ml，弃用。再次更换注射器重新从鞘管内抽取6ml静脉血置于EDTA-抗凝管中；对照组犬用新注射器直接从股静脉取血6ml置于EDTA-抗凝管中。用放血休克法处死犬，取犬左心室心尖部组织，应用RT-qPCR法检测实验组和对照组中血浆和组织的miRNA。 结果：实验组与对照组比较血浆miRNA Ct值明显增高，其差异具有统计学意义（P＜0.01），并且实验组中的所有样品均呈现非特异性扩增，并且扩增曲线相同；组织miRNACt值无明显变化，实验组中所有样品均呈特异性扩增。 结论：静脉注射肝素短时间内对血浆miRNA的PCR扩增效率造成明显影响，对组织miRNA提取及PCR扩增效率无明显影响。
【关键词】：心力衰竭 microRNA 循环microRNA 心衰模型 肝素 miRNA RT-qPCR
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R541.6;R-332
【目录】：

• 第一部分 组织与血浆中 microRNAs 在犬心衰模型中的变化5-25
• 中文摘要5-7
• Abstract7-8
• 前言8-10
• 实验方案10-14
• 实验结果14-21
• 讨论21-24
• 结论24-25
• 第二部分 肝素对组织与血浆 microRNAs 表达的影响25-41
• 中文摘要25-26
• Abstract26-27
• 前言27-28
• 实验方案28-34
• 实验结果34-38
• 讨论38-40
• 结论40-41
• 参考文献41-44
• 论文综述44-51
• 参考文献48-51
• 致谢51-52
• 个人简历52-53

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵红莲;王珠秀;詹艳萍;;主动脉内球囊反搏治疗低心排患者的护理体会[J];承德医学院学报;2010年03期

2 李莹;;36例急性心肌梗死溶栓病人的护理体会[J];当代护士(学术版);2009年04期

3 赵云霞;葛昂;;急性心肌梗死患者静脉溶栓的观察和护理[J];当代护士(学术版);2011年04期

4 姚晓颖;;早期康复护理干预对脑出血偏瘫患者肌力的影响[J];当代护士(下旬刊);2012年04期

5 吴贞云;;胺碘酮加依拉普利治疗老年心房颤动70例临床观察[J];当代医学;2009年02期

6 付娅舒;;生脉注射液联用氨茶碱注射液治疗缓慢性心律失常60例疗效观察[J];当代医学;2009年21期

7 吴柱强;;老年大脉压差单纯收缩期高血压96例治疗比较[J];当代医学;2009年33期

8 赵英艺;;不同半衰期β-B治疗风心病快速房颤疗效观察[J];当代医学;2011年27期

9 尹雪艳;余淑芳;崔敏;;老年钙化性心脏瓣膜病120例临床分析[J];大理学院学报;2009年10期

10 郭然;孙颖慧;商志娟;丛涛;王珂;;房颤心室率对超声测量左室收缩功能的影响[J];大连医科大学学报;2008年06期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 刘玉洁;;升陷汤加味方治疗病态窦房结综合征100例疗效观察[A];2011年中华中医药学会心病分会学术年会暨北京中医药学会心血管病专业委员会年会论文集[C];2011年

2 赵学萍;;浅谈选择性冠状动脉造影术的护理[A];第二十二届航天医学年会暨第五届航天护理年会论文汇编（下册）[C];2006年

3 张丽苇;;南京市中华门和雨花社区中老年人高血压患病调查[A];第二十六届航天医学年会暨第九届航天护理年会论文汇编[C];2010年

4 陈军;程勇;赵建江;;脉络宁注射液对急性冠脉综合征患者血清炎症因子的影响[A];《医药导报》第八届编委会成立大会暨2009年度全国医药学术交流会和临床药学与药学服务研究进展培训班论文集[C];2009年

5 朱明军;张亚静;王永霞;尚广配;;慢性全心衰的临床证候学研究[A];第六次全国中西医结合中青年学术研讨会论文集[C];2008年

6 于晓红;刘俊;李真;王艳娥;;De BakeyⅠ型主动脉夹层致急性下壁心肌梗死一例[A];《中华急诊医学杂志》更名十周年、World Journal of Emergency Medicine创刊一周年庆典《中华急诊医学杂志》第十届组稿会、第三届急诊医学青年论坛论文汇编[C];2011年

7 刘鑫;杨展;;B型主动脉夹层介入治疗的护理体会[A];2012年河南省心血管疾病护理新进展研讨会论文集[C];2012年

8 李红英;张汝倩;;熊去氧胆酸治疗胆汁淤积肝硬化的临床观察[A];医药导报(2013年8月第32卷增刊)[C];2013年

9 王可耀;黄赛杰;徐佳骏;;2010年静脉用药调配中心头孢菌素类药物应用分析[A];医药导报(2013年8月第32卷增刊)[C];2013年

10 张佐慧;;儿科输液处方的用药分析[A];医药导报(2013年8月第32卷增刊)[C];2013年

中国博士学位论文全文数据库 前7条

1 张春芳;益气温阳、活血化瘀方对实验性再狭窄模型血管血小板源生长因子-B的影响[D];黑龙江中医药大学;2006年

2 葛颂;纤维蛋白原在牙周炎与冠心病相关机制中作用的研究[D];四川大学;2006年

3 陈清华;心血瘀阻证心肌血管新生及其养心通脉有效部位方干预效应的研究[D];湖南中医药大学;2008年

4 司徒宝珍;补肾活血化痰法对冠心病患者颈动脉斑块的影响研究[D];广州中医药大学;2010年

5 黄波;尼古丁对Apo-E敲除小鼠调节性T细胞及对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响[D];南方医科大学;2012年

6 秦迪;重组AAV介导多基因促进成熟性血管新生在小鼠后肢缺血微循环中的研究[D];吉林大学;2013年

7 张思毅;喉癌侵袭转移相关的microRNA筛选及分子标签建立[D];南方医科大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前5条

1 金康康;多形貌萘普生药物晶体生长的可视化研究[D];北京化工大学;2007年

2 刘发云;从肝阳虚论治甲状腺功能亢进症的临床研究[D];山东中医药大学;2014年

3 高波;扶阳活血法治疗冠心病心绞痛的临床研究[D];山东中医药大学;2012年

4 沙泰慧;清幽疏肝汤治疗幽门螺杆菌（Hp）相关性消化性溃疡的临床研究[D];山东中医药大学;2014年

5 黄春燕;老年患者万古霉素临床应用分析及安全性相关因素探讨[D];中国人民解放军医学院;2014年

  本文关键词：microRNAs在犬心衰模型中的变化及肝素对其影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：321866