人细小病毒B19XA株VP1蛋白的表达、纯化和免疫原性研究

发布时间：2021-06-15 09:40

　　B19病毒属细小病毒属，是动物病毒中结构最简单的一种单链、线状DNA病毒，于1975年被发现，随后被证实是已知的细小病毒属中唯一致人类疾病的病毒，可引起传染性红斑、关节炎、粒细胞减少症等，甚至引起严重的血液系统疾病。其主要经呼吸道、血液途径和母婴垂直传播，可引起社区局部流行、院内感染和暴发性流行，并在全球普遍存在。1990年首次证实我国存在该病毒感染，随后的研究发现该病毒是我国儿童急性再障危象、急性血小板减少性紫癜及孕妇非免疫性流产等疾病的重要病因之一，并与先天性心脏病、类风湿关节炎（RA）发病相关。同时，我国妇女和儿童血清中保护性抗体水平低，易发生该病毒感染。尤其免疫功能低下或缺陷患者可发生持续感染、重症血液病和慢性贫血，危及生命。 B19病毒基因约5.6kb，由一个内含子和位于两端的重复序列组成。在B19病毒基因组内有两个大的开放读框，编码非结构蛋白（NS）和两个衣壳蛋白（VP1和VP2）。B19病毒序列存在变异。NS基因最为保守，在病毒的复制中起重要的作用，VP1和VP2表现出较大的变异性，约为2～3％。根据酶切图谱的不同，将病毒分为4型。中国西安的 ... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：124 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图IVP卜pQE3O原核表达载体构建示意圈

图ZvPI一pRSETA原核表达载体构建示意图.3重组体的鉴定.3.1酶切鉴定为证实目的基因片段是否插入正确，分别对VPI一pQE0和VPI一pRSETA重组体进行BamHI、Sall和BamHI、Pstl酶切，通过琼脂糖凝胶电泳证实经双酶切分别切出分子约480bp和3.4kb，480bp和2.gkb的片段，与插入片段子量相符，说明目的基因插入正确(图3)

图3vpl一pqE30和vpl一pRsETA重组体酶切鉴定图1:VPI一pRSETA经BamHI、P，tl双酶切2:VPI一PRSETA3;Vpl一pQE30经BamHI、Sa1T双酶切4:VPI一pQE305;pUC19一VPI经BamHI、Sall双酶切，6:PUC19一VP17:marker重组体阳性克隆序列测定I一pQE30和vP一pRsETA重组体阳性克隆递海鼎安生物科技有限公司进行序列测定，测序列完全正确(图4，5，6，7)。TAACAAATCCAGATGGGTTCTGCAGGTCATTACTGAACAGGAGTCCAAGCTCAGCTAATTAAGCTTGGCT

【参考文献】：
期刊论文
[1]我国再障患儿血清中人细小病毒B19 NS基因序列测定及变异分析（英文）[J]. 张国成,苏国平,孙新,许东亮,陈彩平,汤雪晴.  中国当代儿科杂志. 2003(01)
[2]人细小病毒B19中国株VP1蛋白独特区基因片段序列变异分析[J]. 采华,张国成,许东亮,李飚.  第四军医大学学报. 2002(16)
[3]我国人细小病毒B19VP1和VP2部分基因序列测定及变异分析[J]. 张国成,孙新,许东亮,采华,李飚,陈星琪.  第四军医大学学报. 2002(04)
[4]国人细小病毒B19感染相关疾病谱[J]. 张国成,许东亮,王晓明,张笑飞,钱新宏,郑跃杰,李飚.  第四军医大学学报. 1999(06)



本文编号：3230816