Hep G2、Bel-7402细胞裸鼠皮下移植性肝癌模型的实验研究

发布时间：2017-04-24 16:07

  本文关键词：Hep G2、Bel-7402细胞裸鼠皮下移植性肝癌模型的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景 肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一，其中肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）是肝癌中最常见的类型，占到病例总数的70%~80%。为了深入研究肝癌的发病机理，探索新的治疗方法，建立科学的肝癌动物模型是实验的关键。 本课题拟通过比较Hep G2、Bel-7402两种人肝癌细胞在不同条件下行裸鼠皮下移植时成瘤率的不同，以及两种细胞成瘤后肿瘤形态、肿瘤体积变化规律及AFP表达方面的差异，从中选择一种合适的肿瘤细胞，并探索其最佳的成瘤条件，为进一步实验提供数据。 目的 1．比较Hep G2、Bel-7402两种人肝癌细胞在不同条件下行裸鼠皮下移植时成瘤率与成瘤潜伏期的差别。 2．比较Hep G2、Bel-7402两种细胞荷瘤鼠皮下肿瘤生长速度的差别，并归纳其肿瘤增长规律。 3.比较Hep G2、Bel-7402两种细胞荷瘤鼠肿瘤大体形态学差异，检测血清AFP浓度并做肿瘤组织的病理、免疫组化分析。 方法 1．将90只BALB/c裸鼠按照肿瘤细胞悬液的浓度及鼠龄随机平均分成9组，其中8组分别皮下注射Hep G2细胞和Bel-7402细胞，第9组为对照组。比较Hep G2、Bel-7402这两种人肝癌细胞在不同条件下成瘤率与成瘤潜伏期的差别。 2．Hep G2、Bel-7402两种细胞裸鼠皮下成瘤后每周用游标卡尺测量瘤体大小。肿瘤体积的计算公式V=π ab2/6（V：体积，a：肿瘤长径，b：肿瘤短径）。 3．裸鼠成瘤后，利用化学发光法检测裸鼠血清AFP浓度，观察Hep G2、Bel-7402两种细胞形成的裸鼠皮下肿瘤大体形态的差异，将切下的肿瘤组织行免疫组化法检测AFP及Hep Par1表达。 结果 1.当Hep G2细胞悬液浓度达到5.0×107/ml，4~8周龄和8~12周龄的裸鼠均能得到很高的成瘤率（均为100%）。而对于Bel-7402细胞，细胞悬液浓度必须达到5.0×107/ml，且仅在4~8周龄的裸鼠皮下注射才能得到较高的成瘤率（80%）。 2. Hep G2、Bel-7402两种细胞在同等条件下裸鼠个体间的出瘤时间并不恒定，Hep G2细胞平均成瘤时间为19.4±5.2天；而Bel-7402细胞平均成瘤时间为34.3±15.7天。 3. Hep G2细胞裸鼠皮下肿瘤的典型表现为多发的节结样突起，肿瘤组织内部由多个白色的节结样团块组成。Bel-7402细胞皮下肿瘤的表面则为较平滑，肿瘤组织内部周边较韧，瘤体中心则主要是豆腐渣样坏死组织。 4.两种细胞荷瘤鼠成瘤后第4周查血清AFP均阴性。免疫组化检测Hep G2细胞肿瘤HepPar1表达呈阳性、Bel-7402细胞肿瘤Hep Par1表达呈阴性；而两种细胞AFP表达均为阴性。 结论 1．建立裸鼠肝癌动物模型时，Hep G2细胞较Bel-7402细胞更易裸鼠皮下成瘤。 2．Hep G2细胞较Bel-7402细胞成瘤潜伏期更短，，并且成瘤后肿瘤增长速度更快。 3．Hep G2细胞、Bel-7402两种细胞AFP表达均呈阴性。
【关键词】：肝细胞癌 动物模型 甲胎蛋白 Hep G2细胞 Bel-7402细胞
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R735.7;R-332
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 插图、附表清单9-10
• 中英文缩略词表10-11
• 前言11-13
• 第一部分 Hep G2、Bel-7402 两种人肝癌细胞在不同条件下裸鼠皮下移植性肝癌模型成瘤结果分析13-27
• 材料与方法13-18
• 结果18-23
• 讨论23-27
• 第二部分 Hep G2、Bel-7402 两种人肝癌细胞荷瘤鼠血清 AFP 浓度及其肿瘤组织的病理、免疫组化分析27-37
• 材料与方法27-29
• 结果29-33
• 讨论33-37
• 结论37-38
• 参考文献38-41
• 综述41-48
• 参考文献45-48
• 攻读学位期间发表论文情况48-49
• 致谢49-50
• 个人简历50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 董荣春,周荣华,吕发度,陶文照;SMMC-7721人体肝癌细胞株的建立及其生物学特性的初步观察[J];第二军医大学学报;1980年01期

2 张武扬,陶文照,董荣春,吕发度,何德华;SMMC-7721人体肝癌细胞株的电镜和光镜观察[J];第二军医大学学报;1980年01期

3 杨华瑜;张雪妍;闫雪莲;刘敬_";崔景荣;;应用绿色荧光蛋白及活体成像技术建立的小鼠肝癌转移模型[J];中国肺癌杂志;2009年06期

4 董喜环;;甲胎蛋白和癌胚抗原对原发性肝癌的诊断与鉴别诊断价值[J];山东医药;2009年25期

5 陈陵际;运用人癌裸小鼠移植瘤模型进行抗癌新药评价——NCI和EORTC临床前体内药效学研究方法和原则[J];上海实验动物科学;2001年04期

6 高山,艾中立,张力,伍龙,刘汉燕,王璐;丁酸钠诱导人肝癌SMMC-7721细胞分化及其作用机理的初步探讨[J];数理医药学杂志;2005年01期

7 强永乾,郭佑民,鱼博浪,张明;恒定均匀磁场对肿瘤细胞调亡Bcl-2及Bax蛋白表达的研究[J];西安医科大学学报(中文版);2000年02期

8 白建华;李立;李晓延;陈刚;朱新锋;;裸鼠皮下种植性肝癌模型的建立[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年44期

9 毛庭枝;周巧灵;梁荣感;戴支凯;罗伟生;肖胜军;徐庆;;仓鼠胰腺癌细胞株移植性肝癌模型的建立及其生物学特性[J];世界华人消化杂志;2009年18期

10 钱振超;刘金友;赵肃荣;于丽华;张德玉;魏文汉;;我国第一株小鼠可移植性肝细胞性肝癌模型(H615)的建立[J];医学研究通讯;1982年07期

  本文关键词：Hep G2、Bel-7402细胞裸鼠皮下移植性肝癌模型的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：324524