不同浓度维生素C对N-2a细胞及其移植瘤增殖的影响
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【摘要】:目的:通过细胞系和荷瘤鼠观察不同浓度维生素C对N-2a细胞及其移植瘤增殖的影响。 方法: 检测不同浓度维生素C干预N-2a细胞0、24、48、72、96h时的吸光度值(OD),计算细胞生长抑制率;用流式细胞仪观察维生素C干预N-2a细胞48h时细胞的周期分布和凋亡情况;彗星实验分析干预48h时N-2a细胞的DNA损伤情况。 用BALB/c乳鼠建立N-2a细胞移植瘤模型,每天称重并腹腔注射不同剂量的维生素C,濒死时剖取瘤体,称重并测量体积。统计荷瘤生存期,绘制生长曲线,计算瘤体系数,对瘤体进行病理观察以及检测凋亡蛋白Caspase-3的表达。 结果: 1、细胞实验,1)与对照组相比,50μM组增殖差异不显著,100、250、500μM维生素C组表现为促细胞增殖,1000、2500μM组抑制瘤细胞增殖,差异有统计学意义(P0.05)。2)维生素C作用后主要表现为晚期凋亡,并且呈一定的量效关系;实验组与对照组相比,G1期细胞减少,S期细胞增多,差异有统计学意义(P0.05)。3)50、500、1000μM组的DNA迁移长度和迁移率明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);2500μM组的DNA迁移长度和迁移率明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。 2、动物实验,,1)荷瘤生存期分别为:200mM维生素C组51.39±0.95d,400mM组63.72±1.48d,800mM组58.63±0.82d;均高于对照组的37.25±0.46d,差异有统计学意义(P0.05)。2)从新生到2w各组间生长曲线基本一致。从第3w开始,与空白组相比,对照组的生长曲线短而低;400mM组基本呈“S”形,但位置较低;200mM组和800mM组与之较为相近。3)对照组的瘤体体积和瘤体重量均显著低于实验组,差异有统计学意义(P0.05);实验组间,400mM组的瘤体系数最小,差异有统计学意义(P0.05)。4)对照组的恶性化程度最高,几乎都是未分化型瘤细胞,而实验组细胞间的神经纤维丝丰富,明显可见处于分化状态的瘤细胞,并且除纤维丝外基本都是细胞间质。5)Caspase-3蛋白的阳性染色主要定位于胞浆和/或胞核,对照组和实验组相比差异有统计学意义(P0.05)。 结论:在细胞实验中,低浓度维生素C主要表现为保护N-2a细胞免受外来因素损害,并有促进其增殖的作用;高浓度维生素C对N-2a细胞则有一定的损害和抑制增殖作用。从动物实验看,维生素C可以明显延长荷瘤鼠的生存期,但未见瘤体缩小或消失;高剂量时则会减少荷瘤鼠生存期、促进肿瘤增殖。
【关键词】:维生素C N-2a细胞 细胞增殖 移植瘤
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R-332;R73-36
【目录】:
- 中文摘要6-8
- Abstract8-10
- 英文缩略词10-11
- 前言11-13
- 实验流程的示意图13-14
- 第一部分不同浓度维 生素 C 对 N-2a 细胞增殖的影响14-29
- 1 材料与方法14-19
- 1.1 材料14-16
- 1.2 方法16-19
- 2 统计学处理19
- 3 实验结果19-23
- 3.1 不同浓度维生素 C 对 N-2a 细胞增殖的影响19-21
- 3.2 不同浓度维生素 C 对 N-2a 细胞凋亡的影响21-22
- 3.3 不同浓度维生 素 C 对 N-2a 细胞 DNA 损伤的影响22-23
- 4 分析与讨论23-26
- 4.1 维生素 C 对 N-2a 细胞增殖的影响23-24
- 4.2 维生素 C 对 N-2a 细胞凋亡的影响24-25
- 4.3 维生素 C 对 N-2a 细胞 DNA 损伤的影响25-26
- 5 结论26-27
- 参考文献27-29
- 第二部分 不同浓度维生素 C 对 N-2a 移植瘤增殖的影响29-46
- 1 材料与方法29-35
- 1.1 实验材料与仪器29-31
- 1.2 实验方法31-35
- 2 统计学处理35
- 3 结果35-40
- 3.1 一般情况观察35
- 3.2 荷瘤生存期35-37
- 3.3 荷瘤鼠生长曲线37
- 3.4 瘤组织体重指数及系数37-38
- 3.5 瘤组织病理观察38-39
- 3.6 瘤组织的 Caspase-3 蛋白表达39-40
- 4 分析与讨论40-43
- 4.1 实验用鼠及接种日龄的选择40-41
- 4.2 维生素 C 对荷瘤鼠的影响41
- 4.3 维生素 C 对瘤组织的影响41-43
- 5 结论43-44
- 参考文献44-46
- 小结46-47
- 综述47-62
- 参考文献58-62
- 致谢62-63
- 个人简历63-64
【参考文献】
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本文编号:327191
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