蛋白酪氨酸磷酸酶Shp2调控巨噬细胞活化与肺泡微环境稳态研究

发布时间：2021-07-10 16:51

　　巨噬细胞是一群具有高度可塑性的固有免疫细胞,其会随着微环境的不同改变相应的改变功能表型并且也会通过分泌基质金属蛋白酶等参与微环境结构的塑造。Shp2结构上是由两个SH2结构域和一个PTP结构域组成的非受体型酪氨酸磷酸酶。之前的研究表明,其作为关键的信号分子调控病理与生理过程。我们的部分研究表明Shp2在肺泡微环境稳态方面起到非常重要的作用。而作为肺泡微环境中最重要组成部分和最主要的固有免疫细胞,巨噬细胞的活化及其效应分子的表达调控上并不清楚。同时Shp2如何调控巨噬细胞的功能也不是很清楚。因此我们利用条件性巨噬细胞Shp2敲除的基因修饰小鼠模型,离体和体内水平上探究这一调控过程及可能的干预手段。关于巨噬细胞的活化一般意义上被分为两种：经典活化（M1活化）和替代活化（M2活化）。在Thl型细胞因子IFNy/LPS刺激下巨噬细胞呈现M1活化类型；而在Th2型细胞因子IL-4或IL-13刺激下巨噬细胞呈现M2型活化。M2活化的巨噬细胞参与寄生虫感染的防护,损伤修复等病理及病理生理过程,而非正常的M2型活化将正常的生理过程转变为病理过程。因此控制巨噬细胞的M2型活化非常关键,但目前对巨噬细胞M... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

Shp2抑制剂PHPSl处理RAW264.7细胞检测IL4所介导的M2巨嗟细胞标记物表达情况

印迹的手段检测（图2A)。我们检测了突变所引起的Argl的精氨酸酶活性的改变（图2B)；利用定量PCR的手段检测了经典的M2活化标志物Urg】’ F1ZZ1, YM1和Mrcl)的表达水平。可以看到D61G突变显著神制而T468M显著增强巨嗟细胞的M2活化（图2B-F)。综上所述，体外实验结果说明了 Shp2负向调控巨嗟细胞的M2活化。

浙江大学博士学位论文 第一章第二部分背景为C57/b6两小鼠品系经过两代基因型匹配杂交后得到LysM-Cre/Shp2n°=^n。x基因型的小鼠（图3)。通过基因型鉴定，敲除效率鉴定等确定得到小鼠模型（图4)。从LysM-Cre所介导的巨嗟细胞Shp2的敲除效率约为90%。有着非常高的效率和特异性，虽然在中性粒细胞用也有很高的敲除效率，但本底及在引起巨嗟细胞二型活化的环境中性粒细胞的影响非常的小。


本文编号：3276306