同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨基质在桡骨临界骨缺损兔模型中的价值

发布时间：2021-07-27 21:35

　　目的探讨同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨基质对桡骨临界骨缺损兔模型的价值。方法纳入18只成年雄性大白兔,切取双上肢桡骨干中段部分骨质,制备双侧上肢桡骨临界骨缺损模型。将18只兔子随机分为对照组、实验组1和实验组2。对照组未予任何干预,实验组1在骨缺损部位植入脱钙骨基质,实验组2在骨缺损部位植入同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨基质。第8、12周时行X线、病理切片和解剖学检查,明确骨缺损的修复效果。结果骨缺损修复后,8、12周时对桡骨行X线检查,对照组骨缺损修复差; 8周时实验组1部分修复,12周时大部分修复,但仍有1只兔子存在小块骨缺损;8周时实验组2大部分修复,12周时全部修复,实验组2可见髓腔通畅。8、12周时,实验组1和实验组2的Lane-Sandhu组织学评分均显著高于对照组,实验组2的Lane-Sandhu组织学评分均显著高于实验组1（P <0. 05）。造模12周后,对照组骨缺损区多为纤维组织,实验组1有编织骨形成,但骨小梁紊乱;实验组2有板成骨形成,骨小梁排列紧密有序。结论同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨基质对桡骨临界骨缺损兔模型有一定的价值。 

【文章来源】：实用临床医药杂志. 2019,23(19)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

脂肪干细胞的培养及传代(放大倍数100倍)A、B、C、D依次表示原代脂肪干细胞第

DIO染液(1mmol/L)，将稀释后的染液重悬第3代rADSCs，调整细胞浓度为1×106cells/mL，混匀后在CO2培养箱中孵育20min，1000转/min离心10min，去上清液，以新鲜生长培养液重悬细胞;调整细胞密度为3×105cells/mL，接种于脱钙骨材料表面(同一批次)，于细胞培养箱中培养4h后，加入生长培养液;第2天更换成骨诱导液培养，分别于接种3、7d后采用荧光显微镜与共聚焦显微镜观察细胞在三维支架上的生长情况，见图2。A:诱导3d的表现B:诱导7d的表现图2激光共聚焦显微镜观察DIO标记的细胞接种至脱钙骨支架材料上成骨诱导3、7d的表现(放大倍数40倍)将第3代rADSCs以3×105cells/mL密度接种于脱钙骨材料上(同一批次)，培养箱孵育4h后加入GM，第2天更换为成骨诱导液。以生长培养液作为对照组。分别于接种1、3、5、7、9、12、15d后收集材料上的细胞，以Hoechst33258DNA定量方法对rADSCs进行细胞计数，对未接种细胞的脱钙骨材料进行相同的处理，所测值作为空白对照，并从各检测值中减去。利用测得荧光强度的吸光度(OD)值来反映细胞的生长趋势，即OD值越大代表细胞生长趋势越好。见图3。1．7干预方式对照组未予任何干预，实验组1在骨缺损部位植入脱钙骨基质，实验组2在骨缺损部位植入同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨基质。第8、12周时行X线、病理切片和解剖学检查，明确骨缺A:未接种在脱钙骨材料上的细胞;B:已接种在脱钙骨材料上的细胞图3细胞在三维材料上的增殖曲线损的修复效果。1．8观察指标Lane-Sandhu组织学评分标准评分、放射学评第

量方法对rADSCs进行细胞计数，对未接种细胞的脱钙骨材料进行相同的处理，所测值作为空白对照，并从各检测值中减去。利用测得荧光强度的吸光度(OD)值来反映细胞的生长趋势，即OD值越大代表细胞生长趋势越好。见图3。1．7干预方式对照组未予任何干预，实验组1在骨缺损部位植入脱钙骨基质，实验组2在骨缺损部位植入同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨基质。第8、12周时行X线、病理切片和解剖学检查，明确骨缺A:未接种在脱钙骨材料上的细胞;B:已接种在脱钙骨材料上的细胞图3细胞在三维材料上的增殖曲线损的修复效果。1．8观察指标Lane-Sandhu组织学评分标准评分、放射学评第19期闫海等:同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨基质在桡骨临界骨缺损兔模型中的价值·3·


本文编号：3306584