人APOBEC3G基因的克隆表达及HIV-1感染者APOBEC3G/B/F表达的研究

发布时间：2021-07-27 23:14

　　第一部分:人APOBEC3G基因的克隆与真核表达目的建立宿主固有抗HIV-1因子载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G（apolipoprotein B mRNA-editing enzyme,catalytic polypeptide-like 3G,APOBEC3G,hA3G）的真核表达体系。方法采用反转录—聚合酶链反应（RT-PCR）技术从HIV-1感染者外周血单个核细胞（PBMC）中获取hA3G基因编码区,将其连接入T载体,测序验证后再克隆至真核表达载体pEGFP-N1中,然后将重组质粒pEGFP-N1-A3G转染HEK293T细胞,分别用RT-PCR法和蛋白印迹法（Western Blot）验证融合蛋白hA3G-EGFP在mRNA和蛋白水平的表达。结果克隆获得hA3G基因编码区长1 154 bp,测序结果与GenBank中hA3G参考序列（NM021822）比对发现存在两处差异,分别位于mRNA第588位和746位碱基处。重组质粒pEGFP-N1-A3G转染HEK293T细胞,在荧光显微镜下观察到了绿色荧光,并分别用RT-PCR法和Western Blot法验证了目的基... 

【文章来源】：复旦大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 人APOBEC3G基因的克隆与真核表达
    试剂与材料
    主要仪器
    实验方法
    实验结果
第二部分 HIV-1感染者PBMC中APOBEC3G/B/F基因表达水平及其与CD4~+T细胞计数的相关性研究
    试剂与材料
    主要仪器
    实验方法
    实验结果
小结
讨论
参考文献
综述
英文缩略词表
硕士期间发表论文和参编书籍
致谢



本文编号：3306731