雷公藤红素对破骨细胞分化和胶原诱导关节炎鼠模型骨侵蚀的影响

发布时间：2021-09-01 20:10

　　实验目的：探讨雷公藤红素对破骨细胞分化和胶原诱导关节炎鼠模型骨侵蚀的影响。实验方法：1.细胞模型：通过诱导RAW264.7向破骨细胞分化,观察雷公藤红素对破骨细胞分化成熟的影响及分子机制。内容主要包括：1.通过CCK-8及Annexin V-FITC/PI双染法确定雷公藤红素作用于诱导RAW264.7向破骨细胞分化过程的安全浓度；2.通过TRAP染色及骨吸收陷窝实验观察雷公藤红素对破骨细胞分化成熟及骨吸收功能的影响；3.通过检测破骨细胞分化标志性基因（Trap、Ctsk、CTR、MMP-9）,分化相关转录因子（c-Fos、c-Jun、NFATc1）的表达及破骨细胞分化下游NF-κBp65、MAPK （ERK、JNk和p38）信号通路的磷酸化水平,探讨雷公藤红素影响破骨细胞分化成熟及骨吸收功能的分子机制。2.动物模型：胶原诱导关节小鼠关节炎（CIA）模型,探讨雷公藤红素对CIA模型鼠骨侵蚀的影响及机制。内容主要包括：1.通过小鼠关节炎评分及关节病理切片HE染色观察雷公藤红素对胶原诱导关节炎小鼠关节炎症的作用；2.通过小鼠关节Micro-CT三维重建及血清中及关节中TRAP的表达,直观观察... 

【文章来源】：南京中医药大学江苏省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词
前言
    1. 破骨细胞的迁移、分化及功能与类风湿关节炎骨侵蚀的关系
        1.1 破骨前体细胞的迁移
        1.2 破骨细胞的分化
        1.3 破骨细胞的功能
        1.4 破骨细胞的靶向治疗
    2. 中医学对类风湿关节炎骨侵蚀的研究
        2.1 中医学对类风湿关节炎骨侵蚀病因病机的认识
        2.2 中医药对类风湿关节炎骨质侵蚀的治法探讨
    3. 雷公藤红素的研究进展
        3.1 雷公藤与雷公藤红素
        3.2 雷公藤红素的药理作用
        3.3 雷公藤红素对类风湿关节炎研究进展
    4. 本课题研究思路
    5. 本课题的创新点
第一部分 雷公藤红素对体外诱导的RAW264.7向破骨细胞分化及骨吸收功能的影响
    前言
    材料与方法
        1. 实验材料
        2. 实验方法
        3. 统计学处理
    实验结果
        1. CCK8法测定雷公藤红素对RAW264.7细胞增殖的影响
        2. Annexin V-FITC/PI双染法测定雷公藤红素对RAW264.7向破骨细胞分化凋亡的影响
        3. 雷公藤红素对RAW264.7向破骨细胞分化过程抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色的影响
        4. 雷公藤红素对RAW264.7向破骨细胞分化过程骨吸收陷窝的形成的影响
        5. 雷公藤红素对RAW264.7向破骨细胞分化过程中标志性基因Trap、Ctsk、CTR、MMP-9 mRNA表达的影响
        6. 雷公藤红素对RAW264.7向破骨细胞分化相关转录因子c-Fos、c-Jun及NFATc1表达的影响
        7. 雷公藤红素对RAW264.7向破骨细胞分化过程NF-κB p65及MAPK(JNK、ERK、p38)信号通路的影响
    小结
第二部分 雷公藤红素对胶原诱导关节炎小鼠骨侵蚀的影响
    前言
    材料与方法
        1. 实验动物
        2. 实验材料
        3. 实验方法
        4. 统计学处理
    实验结果
        1. 基本体征
        2. 关节炎评分
        3. Micro-CT
        4. 关节病理切片HE染色结果
        5. 血清中及关节中TRAP的表达
        6. Real-time PCR检测关节软骨中破骨细胞标志性基因及转录因子的相对定量表达
    小结
讨论
    1. 雷公藤红素抑制破骨细胞的分化及功能
    2. 雷公藤红素通过抑制破骨细胞分化相关转录因子c-Fos、c-Jun、NFATc1的表达及NF-κB、MAPK的磷酸化水平抑制破骨细胞的分化及骨吸收功能
    3. 雷公藤红素抑制胶原诱导关节炎小鼠骨侵蚀
结论
参考文献
攻读学位期间发表的论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]独活寄生汤治疗类风湿性关节炎68例[J]. 杨新玲,宋晓莉.  陕西中医. 2010(04)
[2]四妙消痹汤治疗类风湿关节炎活动期临床研究[J]. 周彩云,唐今扬,房定亚,潘峥,马芳.  中国中西医结合杂志. 2010(03)
[3]清络通痹颗粒对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖及RANKL表达的影响[J]. 黄艳,周学平,王明艳,周玲玲,杨研华,沈计荣,陆燕.  中药新药与临床药理. 2009(06)
[4]中药痹愈汤对类风湿关节炎骨破坏和修复的实验研究[J]. 董宏生,陈誩,李春红,胡荫奇,王玉明,董占斌.  中国实验方剂学杂志. 2009(08)
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[9]补肾通络中药在类风湿性关节炎骨侵蚀中的保护效应[J]. 魏国强,李钊,吴卓,欧建锋.  中药材. 2007(07)
[10]补肾复方含药血清对大鼠成骨细胞OPG、ODF表达的影响[J]. 肖鲁伟,王伟东,童培建,代燎原.  中医正骨. 2006(09)

博士论文
[1]清热活血法治疗活动期类风湿关节炎临床与机制研究[D]. 姜泉.福建中医药大学 2012
[2]新型二甲基苯并吡喃衍生物诱导Hela细胞死亡的机制研究[D]. 张新.沈阳药科大学 2012
[3]养阴清络法对类风湿关节炎骨质破坏的干预作用及机制研究[D]. 韩尽斌.南京中医药大学 2011



本文编号：3377615