抗辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶（NRDR）单克隆抗体的制备和鉴定

发布时间：2021-09-05 07:19

　　全反式维甲酸（All-trans retinoic acid, atRA）是维生素A（Vitamin A）的代谢产物,是脊椎动物体内重要的生物活性物质,通过与其核内受体结合调节基因的转录参与细胞生长、细胞分化、形态发生、免疫功能调节等生理过程。在抗感染、抑制肿瘤细胞生长及增殖、诱导（肿瘤）细胞分化和凋亡等方面,维甲酸类化合物也具有广泛的生物学作用。临床上,维甲酸类化合物已广泛应用于预防及治疗一些恶性肿瘤,包括乳腺癌、皮肤癌、宫颈癌、早幼粒细胞白血病等。体内维甲酸类化合物的平衡受饮食及其相关代谢酶等因素的影响,其相关酶类调控代谢的机制至今仍未完全阐明。辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶（NADP（H） dependent retinol dehydrogenase/reductase, NRDR）是从兔肝中发现并纯化的一种酶,具有很强的视黄醇氧化与视黄醛还原活性。视黄醇（Ratinol）在体内经两步代谢生成维甲酸,中间代谢产物为视黄醛（Ratinal）。Ratinol生成Ratinal的反应是体内维甲酸合成的限速步骤,因此NRDR在调节生物体内维甲酸的稳态过程中起着重要作用。鉴于NRDR分子... 

【文章来源】：汕头大学广东省

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

单克隆抗体制备技术Fig1-2TheProductionofMonoclonalAntibodies

图 1-3 细胞融合与 HAT 选择示意图Fig1-3 principle of cell fusing and HAT selectingengineered antibodies, GEAs）技术[28]。基因工程抗体可以对抗体的单区、最小识别单位、Fv、Fab，甚至是完整的抗体分子进行改造，大大降低了鼠单克隆抗体的异源性，具有低或无免疫原性、组织穿透力强、分子量小、成本低、可规模化生产等特点，同时还可以根据需要在抗体分子上连接治疗或诊断运用的药物及其他分子，这使得单克隆抗体在临床治疗中有了更广阔的应用前景。虽然目前对基因工程抗体的研究很活跃，但细胞工程技术由于其制备方法简单且得到的抗体性能稳定并有较高活性，故目前仍是研究制备单克隆抗体的首选方法，故本实验仍采用传统的杂交瘤技术来制备抗 NRDR 的单抗。

M2 1-1 诱导表达的兔 NRDR 蛋白 SDS-PA标准； 1：表达菌株诱导前 2：3-1 SDS-PAGE of the recombinant raber 1: bacterial lysate witho bacterial lysate with L-Ara induction f层析纯化rose柱后大部分附着于凝胶上，用 50-PAGE分析，目的蛋白在含 500 mm26

【参考文献】：
期刊论文
[1]兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶的功能性表达、纯化及活性鉴定[J]. 谢健平,刘戈飞,宋旭红,杜昆,李蕊,梁斌,张巧霞,黄东阳.  汕头大学医学院学报. 2007(01)
[2]全反式维甲酸联合三氧化二砷治疗初发APL的进展[J]. 周建中,薛桦.  临床军医杂志. 2006(06)
[3]一种人神经母细胞瘤辅酶II-依赖性视黄醇脱氢酶cDNA的克隆及特征分析[J]. 李一凡,刘戈飞,宋旭红,杜昆,黄东阳.  癌变.畸变.突变. 2005(06)
[4]抗慢性B淋巴细胞白血病患者IgM单抗相对亲和力的分析[J]. 沈关心,苏娜,王晓林,朱慧芬,张悦,刘少祥.  细胞与分子免疫学杂志. 1992(03)



本文编号：3384907