甘露糖受体在哮喘大鼠模型中作用的研究

发布时间：2017-05-01 18:02

  本文关键词：甘露糖受体在哮喘大鼠模型中作用的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：第一部分甘露糖受体在哮喘大鼠肺组织中的表达变化 研究目的 研究哮喘模型SD大鼠肺组织中甘露糖受体基因和蛋白表达水平的变化。 材料与方法 建立哮喘SD大鼠模型。应用免疫组织化学和Western-blot方法检测肺组织中甘露糖受体（MR）蛋白表达水平。应用Real Time-PCR方法检测肺组织中MR基因表达水平。 实验结果 哮喘组大鼠肺组织中MR基因和蛋白表达水平均较对照组显著升高（P＜0.05）。 结论 哮喘组大鼠肺组织中MR mRNA和蛋白表达均较对照组明显增高，提示MR可能与哮喘的发病机制有关。 第二部分甘露糖受体在哮喘大鼠模型肺泡巨噬细胞和气道平滑肌细胞中的表达变化及其对肺泡巨噬细胞内吞活性的影响 研究目的 1、研究SD大鼠在哮喘状态下，肺泡巨噬细胞（AMs）甘露糖受体的表达变化，及其对肺泡巨噬细胞内吞活性的影响。 2、研究SD大鼠在哮喘状态下，气道平滑肌细胞（ASMCs）甘露糖受体的表达变化。 材料与方法 建立哮喘SD大鼠模型，麻醉后行支气管肺泡灌洗，分离并培养肺泡灌洗液（BALF）中AMs，处死后培养原代气道平滑肌细胞，取3~5代ASMCs。 实验分组： （1）对照组（N组）：即为正常对照组大鼠细胞，无任何干预刺激； （2）哮喘组（A组）：即为哮喘组大鼠细胞，不加任何干预刺激； （3）哮喘+白细胞介素4（IL-4）组（A+I组）：哮喘组大鼠细胞加入10μg/ml重组大鼠IL-4刺激24小时； （4）哮喘+D-(+)-甘露糖（mannose）组（A+M组）：哮喘组大鼠细胞加入50μmol/ml D-(+)-mannose刺激24小时。 （5）哮喘+甘露糖受体小干扰RNA组（A+R组）：哮喘组大鼠细胞20μmol/mlMR siRNA刺激24小时； （6）哮喘+白细胞介素4+D-(+)-甘露糖（mannose）组（A+I+M组）：哮喘组大 鼠细胞同时加入10μg/ml IL-4和50μmol/ml D-(+)-mannose刺激24小时。应用免疫荧光方法检测各组细胞中MR蛋白水平的表达；Real-Time PCR检测各组ASMCs中MR基因水平的表达变化；流式细胞术检测各组AMs内吞活性的改变；ELISA检测支气管肺泡灌洗液（BALF）上清中IL-4的含量。 实验结果 1、对比对照组，哮喘组大鼠BALF上清中IL-4的含量明显升高，差异具有统计学意义（p＜0.01）。 2、对比对照组，哮喘组、哮喘+M组大鼠AMs MR蛋白水平表达均升高，差异均具有统计学意义（p＜0.05）；对比哮喘组大鼠，AMs经IL-4干预后，MR蛋白水平表达较对照组AMs增加（p＜0.01）；经D-(+)-mannose干预后AMsMR蛋白水平表达无明显变化；经MR siRNA干预后AMs MR蛋白水平的表达降低，且差异有统计学意义（p＜0.05）；经D-(+)-mannose和IL-4干预后且AMs MR蛋白水平的表达增加，，但差异无统计学意义（p＞0.05）； 3、对比对照组大鼠，哮喘组大鼠AMs的内吞活性升高，且差异有统计学意义（p＜0.05）；对比哮喘组大鼠，AMs经IL-4干预后，内吞活性升高（p＜0.05）；D-(+)-mannose干预后AMs的内吞活性降低，且差异有统计学意义（p＜0.05）；经MR siRNA干预后AMs的内吞活性降低（p＜0.05）；经D-(+)-mannose和IL-4干预后且AMs的内吞活性降低，但差异无统计学意义（p＞0.05）。 4、对比对照组，哮喘组、哮喘+M组大鼠ASMCs MR基因和蛋白水平表达均升高，差异均具有统计学意义（p＜0.05）；对比哮喘组大鼠，ASMCs经IL-4干预后，MR蛋白（p＜0.01）和基因水平（p＜0.05）表达均增加；经D-(+)-mannose干预后ASMCs MR蛋白和基因水平的表达无明显变化；经MR siRNA干预后ASMCs MR的蛋白（p＜0.01）和基因（p＜0.05）水平表达降低；经D-(+)-mannose和IL-4干预后且ASMCs MR的蛋白和基因水平表达增加，但差异无统计学意义（p＞0.05）。 结论 在大鼠哮喘状态下，AMs、ASMCs中MR蛋白水平的表达均升高，ASMCsMR基因水平的表达升高；IL-4刺激可以上调MR基因和蛋白水平表达；AMs的内吞活性较对照组升高，且MR与AMs的内吞活性相关。以上结果提示，哮喘状态下，MR的表达上调，可能参与AMs内吞活性的调节，AMs、 ASMCs可能通过MR通路参与气道的炎症反应和气道重塑，从而参与哮喘的发生发展过程。
【关键词】：肺组织 甘露糖受体 哮喘 气道平滑肌细胞 肺泡巨噬细胞 IL-4 甘露糖受体 内吞活性 哮喘
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R562.25
【目录】：

• 中英文缩略词一览表5-6
• 中文摘要6-10
• Abstract10-14
• 第一部分14-35
• 前言14-16
• 1 实验材料16-17
• 2 实验方法17-24
• 3 实验数据统计学分析24-25
• 4 实验结果25-26
• 5 讨论26-28
• 6 附图28-32
• 参考文献32-35
• 第二部分35-58
• 前言35-37
• 1 实验材料37-38
• 2 实验方法38-42
• 3 实验数据统计学分析42-43
• 4 实验结果43-45
• 5 讨论45-47
• 6 附图47-55
• 参考文献55-58
• 综述58-66
• 参考文献63-66
• 致谢66

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 初海鹰;杨佩满;张嘉宁;;L-选择素和甘露糖受体与肿瘤淋巴转移的相关性[J];解剖科学进展;2006年03期

2 左大明,陈政良;巨噬细胞甘露糖受体的结构与功能[J];免疫学杂志;2004年S1期

  本文关键词：甘露糖受体在哮喘大鼠模型中作用的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：339359