锌对心理应激所致海马损伤的调节作用及机制研究

发布时间：2021-10-08 07:17

　　研究慢性心理应激致海马的损伤效应，并对锌调节应激反应的作用及可能机制进行探讨。通过建立整体和细胞水平的应激模型，观察心理应激对不同锌营养状况大鼠行为以及心理应激／皮质酮对海马神经元的损伤效应；并从Glu-NMDA受体通路及Ca²⁺-CaM体系变化的角度探讨锌调节应激反应及应激损伤的可能机制。内容涉及动物模型建立，生化指标测定，放免测定，原位杂交，流式细胞术，膜片钳技术，细胞培养及相关分子生物学方法。 实验结果表明，光电应激导致实验大鼠旷场行为异常，在应激程度相同的条件下，缺锌动物表现更明显，表明锌营养状况对机体应激反应有影响。应激还导致海马和皮层神经元发生一定程度的凋亡，海马损伤更为严重；在同等应激条件下，缺锌动物凋亡情况较对照严重，表明缺锌使机体抵抗应激损伤的能力减弱。锌对皮质酮所致体外培养大鼠海马神经元的损伤具有双向调节作用：较低浓度锌可增强神经元对高水平糖皮质激素的耐受性，减轻神经元损伤的程度；而高浓度锌则加重皮质酮损伤海马神经元的效应。 光电应激导致海马细胞[Ca²⁺]_i-CaM体系发生变化，缺锌大鼠... 

【文章来源】：中国人民解放军军事科学院北京市

【文章页数】：104 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中英文缩写字表
前言
一、 材料与方法
    (一) 实验设计
    (二) 在体实验
        1 实验动物分组和喂养
        2 心理应激模型的建立及动物旷场行为测定
        3 海马谷氨酸含量及海马突触体谷氨酸摄取测定
        4 海马NMDA受体变化
        5 海马细胞[Ca~(2+)]_i及CaM水平测定
        6 细胞凋亡的测定
        7 原位杂交检测NR1、NR2A mRNA表达
    (三) 体外实验
        1 大鼠海马神经元的原代培养
        2 培养上清中LDH和NO水平测定
        3 神经元存活率、凋亡和坏死的测定
        4 RT-PCR检测NR1、NR2A、NR2BmRNA表达
        5 海马神经元膜静息电位的测量
    (四) 数据处理
二、 结果与讨论
    (一) 应激动物模型及其行为变化
        1 动物摄食量和体重变化
        2 血清皮质醇水平变化
        3 动物旷场行为变化
        4 分析讨论
    (二) 海马神经元凋亡和／或坏死
        1 海马组织DNA ladder测定结果
        2 海马组织TUNEL测定结果
        3 体外培养海马神经元存活率的变化
        4 培养上清中LDH、NO水平测定
        5 体外培养海马神经元的凋亡和坏死情况
        6 分析讨论
    (三) 海马Ca~(2+)-CaM体系的变化
        1 海马细胞[Ca~(2+)]_i水平测定结果
        2 海马细胞活性CaM水平测定结果
        3 分析讨论
    (四) 海马GIu-NMDA受体通路的变化
        1 海马组织谷氨酸含量及海马突触体谷氨酸摄取变化
        2 体外培养海马神经元膜静息电位的测量
        3 海马NMDA受体结合实验结果
        4 原位杂交检测海马NMDA受体亚基NR1、NR2A mRNA表达
        5 RT-PCR检测体外培养海马神经元NR1、NR2A、NR2B mRNA表达
        6 分析讨论
三、 结论
四、 参考文献
五、 文献综述
    一、 锌营养与脑功能及行为的关系研究-历史和现状
    二、 中枢神经系统中锌抑制NMDA受体反应的机制
附: 在学期间发表的论文(全文)
致谢



本文编号：3423682