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吴茱萸汤通过热敏通道瞬时电位锚蛋白-1抑制福尔马林内脏痛模型小鼠的疼痛研究

发布时间:2021-10-19 19:17
  目的探查吴茱萸汤减轻福尔马林诱导的内脏痛模型小鼠的疼痛作用机制。方法 40只C57BL/6雄性小鼠,随机分为正常组、模型组、吴茱萸汤低剂量组、吴茱萸汤中剂量组和吴茱萸汤高剂量组。吴茱萸汤各剂量组分别灌以吴茱萸汤水煎液[3.12、6.24、12.48 g/(kg·d)],共4天。第4天,吴茱萸汤各剂量组灌胃后2小时,以瞬时感受器电位锚蛋白-1(transient receptor potential ankyrin 1,TRPA1)激动剂10%福尔马林,10μL/只灌肠,在福尔马林诱导的急性内脏痛模型小鼠上,观察吴茱萸汤干预后的疼痛行为变化和运用免疫组化染色及免疫印迹法检测吴茱萸汤干预后的小鼠结肠组织中TRPA1的表达变化。结果 HE染色显示吴茱萸汤各剂量组干预均可使小鼠结肠中肌层、黏膜层坏死减轻,炎性浸润减少,受损的隐窝修复;行为学实验观察吴茱萸汤高、中、低剂量预处理4天后与模型组对比,小鼠疼痛行为频次明显降低(P<0.05);免疫组化实验,吴茱萸汤高、中、低剂量预处理后,与模型组对比,肌层的TRPA1阳性表达明显下调(P<0.05);蛋白条带密度分析提示,吴茱萸汤高、中剂... 

【文章来源】:环球中医药. 2019,12(08)

【文章页数】:5 页

【部分图文】:

吴茱萸汤通过热敏通道瞬时电位锚蛋白-1抑制福尔马林内脏痛模型小鼠的疼痛研究


各组小鼠结肠炎症对比(HE×100)2.2吴茱萸汤减少福尔马林内脏痛模型小鼠疼痛行为注:A:正常组;B:

吴茱萸汤,福尔马林,内脏痛,免疫组化


August2019,Vol.12,No.8表2免疫组化染色显示各组小鼠结肠组织中TRPA1表达对比(x±s,n=8)组别剂量(g/kg)IODofTRPA1正常组-72.50±15.57模型组-153.82±17.60a吴茱萸汤低剂量组3.12136.48±19.17b吴茱萸汤中剂量组6.2498.49±15.24b吴茱萸汤高剂量组12.4886.85±11.07b注:与正常组比较,aP<0.05;与模型组比较,bP<0.05。注:A:正常组;B:模型组;C:吴茱萸汤低剂量组;D:吴茱萸汤中剂量组;E:吴茱萸汤高剂量组。图2各组小鼠结肠组织中TRPA1表达对比(免疫组化×100)2.4吴茱萸汤下调福尔马林内脏痛小鼠结肠组织中TRPA1表达如图3、表3所示,蛋白条带密度分析提示,与正常组相比,福尔马林模型组小鼠结肠组织中TR-PA1表达明显高于正常组(P<0.05)。吴茱萸汤高、中剂量预处理后能使小鼠结肠组织中TRPA1表达下调,与模型组差异明显(P<0.05)。表3各组小鼠结肠组织中TRPA1表达对比(x±s,n=6)组别剂量(g/kg)TRPA1/β-tubulin正常组-0.15±0.08模型组-0.53±0.10a吴茱萸汤低剂量组3.120.45±0.06吴茱萸汤中剂量组6.240.33±0.11b吴茱萸汤高剂量组12.480.36±0.06b注:与正常组比较,aP<0.05;与模型组比较,bP<0.05。图3WB显示各组小鼠结肠组织中TRPA1表达对比3讨论在这个实验中明确了吴茱萸汤可以抑制福尔马林诱导的疼痛。福尔马林疼痛模型广泛用于评估动物实验中化合物的镇痛作用,其中包括福尔马林结肠给药造模诱导的内脏炎性疼痛模型[10-11]。结肠内施用福尔

吴茱萸汤,福尔马林,疼痛模型,传入神经元


橹??TR-PA1表达明显高于正常组(P<0.05)。吴茱萸汤高、中剂量预处理后能使小鼠结肠组织中TRPA1表达下调,与模型组差异明显(P<0.05)。表3各组小鼠结肠组织中TRPA1表达对比(x±s,n=6)组别剂量(g/kg)TRPA1/β-tubulin正常组-0.15±0.08模型组-0.53±0.10a吴茱萸汤低剂量组3.120.45±0.06吴茱萸汤中剂量组6.240.33±0.11b吴茱萸汤高剂量组12.480.36±0.06b注:与正常组比较,aP<0.05;与模型组比较,bP<0.05。图3WB显示各组小鼠结肠组织中TRPA1表达对比3讨论在这个实验中明确了吴茱萸汤可以抑制福尔马林诱导的疼痛。福尔马林疼痛模型广泛用于评估动物实验中化合物的镇痛作用,其中包括福尔马林结肠给药造模诱导的内脏炎性疼痛模型[10-11]。结肠内施用福尔马林引起的疼痛行为在给药后30分钟达到最大值再逐渐减少。此外,疼痛评分也与脊髓中广动力学性(widedynamicrange,WDR)神经元放电率的变化一致,在30分钟同样达到峰值并逐渐降低,直至90分钟后消失[10-12]。福尔马林诱导的疼痛是由热敏通道TRPA1介导的。TRPA1在内脏传入神经元中表达,参与内脏的炎症反应和超敏反应,TRPA1特异性阻滞剂HC-030031可以抑制这种疼痛行为[13]。TRPA1属于非选择性阳离子通道的瞬时受体电位(transientreceptorpotential,TRP)家族中的一员,是典型的温度敏感通道,TRPA1在17°C左右温度被活化,接近人类有害寒冷的阈值(15°C)。中药白芥子、肉桂、白芷和大蒜[14-16]中的活性成分可以激活TRP

【参考文献】:
期刊论文
[1]基于热敏通道TRPV1探讨吴茱萸汤对醋酸内脏痛模型小鼠的止痛作用[J]. 刘珍洪,高琳,汪文来,赵红霞,高蔚,安致君,郭蓉,吴丹桐,杨桢.  成都中医药大学学报. 2017(03)
[2]热敏通道与辛味中药的解表原理[J]. 杨桢,汪文来,刘珍洪,高蔚,杨阳,安致君,赵红霞,Michael Xi Zhu.  中国中医基础医学杂志. 2016(10)
[3]热敏通道:“寒者热之,热者寒之”的细胞和分子生物学意义[J]. 杨桢,高琳,赵红霞,芦冲,李冀.  中国中医基础医学杂志. 2014(10)
[4]加味吴茱萸汤联合西药对脾胃虚寒型幽门螺杆菌相关性慢性胃炎的疗效观察[J]. 魏岳斌,杨小兰,程善廷.  中国中西医结合消化杂志. 2013(05)
[5]附子理中汤合吴茱萸汤加减治疗小儿慢性泄泻1例[J]. 宫凤英,朱淑然,文毓声,黄荣铝,王中华,吕英.  河南中医. 2012(10)
[6]枳术吴茱萸汤治疗老年胃食管反流病28例探讨[J]. 李季委,李凌霞.  中医药信息. 2007(01)

硕士论文
[1]基于热敏通道TRPV1、TRPA1探讨吴茱萸汤的散寒止痛机理[D]. 刘珍洪.北京中医药大学 2017



本文编号:3445461

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