日本血吸虫虫卵抗原诱导产生调节性B细胞的特性研究

发布时间：2017-05-05 18:01

  本文关键词：日本血吸虫虫卵抗原诱导产生调节性B细胞的特性研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：在我国,日本血吸虫的感染和流行仍然是当今主要的公共卫生问题之一。血吸虫病是一种典型的慢性感染性疾病,在血吸虫感染过程的不同时期机体免疫系统针对血吸虫各发育阶段的不同抗原产生不同的优势免疫应答。日本血吸虫成虫抗原(SWAP)和虫卵抗原(SEA)是血吸虫感染过程中最主要的两种抗原成分。调节性B细胞(Bregs)是一类具有负性调节作用的B细胞亚群,可以分泌IL-10和/或TGF-p等细胞因子,在自身免疫病、慢性炎症、肿瘤及寄生虫感染等疾病中发挥着重要的作用。但SEA和SWAP是否能够诱导Bregs产生,及诱导产生的Bregs的特性仍不十分清楚。本研究目的是：(1)通过体内、体外动物实验研究日本血吸虫SEA和SWAP是否可以诱导Bregs的产生及其机制；(2)进一步研究日本血吸虫SEA诱导产生的Bregs的特性。本研究用SEA、SWAP和LPS分别体外刺激小鼠脾脏单个核细胞和磁珠分选后的脾脏CD19+B细胞,72h后用ELISA法检测培养上清中IL-10、IL-4、IFN-γ、TGF-β的水平,用流式细胞术分别检测细胞表面CD80.CD86及CD40的表达和CD19+IL-10+B细胞比例。体内实验用SEA、SWAP、PBS分别和不完全弗氏佐剂以1：1比例混合免疫小鼠,1次/周,共3次,末次免疫后7天取小鼠脾脏,用ELISA法检测培养上清中IL-10、IL-4、IFN-γ、TGF-β的水平,同时用流式细胞术检测CD19+IL-10+B细胞比例。之后用ERK.JNK.p38MAPK和NF-κB信号转导抑制剂检测Bregs细胞分泌细胞因子IL-10水平的变化。结果发现SEA在体内、外均能刺激小鼠脾脏CDl9+B细胞分泌IL-10,而且可诱导脾脏CD19+B细胞分化为CD19+IL-10+B细胞,而SWAP在体内、外均不能刺激脾脏CD19+B细胞分泌IL-10,但是SWAP在体内可刺激小鼠脾脏CD19+B细胞分泌IFN-γ。此外,SWAP体内外条件均不能诱导脾脏细胞分化为CD19+IL-10+B细胞。SEA可以通过NF-κB.ERK.JNK和p38MAPK信号转导通路刺激小鼠B细胞分泌细胞因子IL-10。 同时,本研究用SEA、LPS刺激小鼠脾脏CD19+B细胞,72h后,磁珠分选出分泌IL-10的B细胞,将此细胞和磁珠分选出的CD4+T细胞共孵育,同时加入Anti-CD3、Anti-CD28,72h后,用ELISA法检测细胞上清中活化的CD4+T分泌的IL-4和IFN-γ细胞因子的变化,流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+T、CD4+IL-4+T、CD4+IFN-γ+T细胞的比例。结果表明分泌IL-10的B细胞可诱导活化的CD4+T细胞分泌IL-4,且能够增加CD4+CD25+Foxp3+T细胞、CD4+IL-4+T细胞的数量。我们认为,通过小鼠体内、外试验,可以实现对日本血吸虫SEA可诱导Bregs产生及其特性的研究,研究结果将有助于我们深入了解日本血吸虫感染过程中Bregs所发挥的负向免疫调节作用,从而为血吸虫感染免疫调控机制的深入研究提供新的免疫学依据。
【关键词】：日本血吸虫 可溶性虫卵抗原 可溶性成虫抗原 调节性B细胞 T细胞 IL-10
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R383.24
【目录】：

• 中文摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 缩略词表7-9
• 前言9-13
• 参考文献10-13
• 第一部分 日本血吸虫虫卵抗原诱导分泌IL-10的B细胞产生及活化B细胞的机制13-31
• 1 实验材料13-15
• 2 仪器与耗材15-16
• 3 实验方法16-20
• 4 统计分析20
• 5 结果20-28
• 6 讨论28-29
• 参考文献29-31
• 第二部分 日本血吸虫虫卵抗原诱导产生分泌IL-10的B细胞的特性研究31-39
• 1 实验材料31
• 2 实验方法31-34
• 3 统计分析34-35
• 4 结果35-37
• 5 讨论37-38
• 参考文献38-39
• 文献综述39-48
• 参考文献44-48
• 致谢48-49
• 攻读学位期间发表的学术论文目录49-50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 钱莉;佟大可;潘兴元;田芳;龚卫娟;季明春;;脂多糖对B细胞的活化作用及机制的初步研究[J];第二军医大学学报;2011年11期

2 杨红振;李辙;刘含智;米粟;胡卓伟;;调节性B细胞的发现和研究进展[J];生理科学进展;2009年04期

3 曹明媚;潘卫;戚中田;;传统教学手段与多媒体技术相结合上好医学微生物学[J];山西医科大学学报(基础医学教育版);2007年06期

4 陈鹏;王文林;;Th1/Th2细胞因子与蠕虫感染[J];中国病原生物学杂志;2009年04期

5 杨维平;李国才;;蠕虫免疫调控与“蠕虫疗法”[J];中国病原生物学杂志;2010年12期

6 余传信;吴宇迪;王s

本文编号：346792