sFcγRⅡb蛋白结合肽的筛选与鉴定

发布时间：2021-11-05 10:45

　　FcγRⅡb是免疫球蛋白G受体（FcγR）中唯一的抑制型受体,在免疫反应的负性调节方面发挥重要作用.为了筛选sFcγRⅡb的蛋白结合肽,以重组sFcγRⅡb蛋白为靶分子,采用噬菌体肽库展示技术对sFcγRⅡb结合肽进行筛选.利用ELISA鉴定每轮洗脱噬菌体与sFcγRⅡb蛋白亲和力,经过4轮筛选,挑取40个噬菌体克隆进行序列测定,获得28种不同的12肽序列.经ELISA法鉴定噬菌体与sFcγRⅡb蛋白结合活性,得到sFcγRⅡb蛋白高特异性、高亲和力结合肽FHKMPWYMSMYY,为进一步研究FcγRⅡb的作用机制和探索结合肽的功能提供实验基础. 

【文章来源】：河北大学学报(自然科学版). 2019,39(04)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 噬菌体肽库的生物淘选
        1.2.2 噬菌体滴度测定
        1.2.3 噬菌斑扩增
        1.2.4 单链噬菌体DNA的提取
        1.2.5 单链噬菌体DNA序列测定
        1.2.6 ELISA 法挑选噬菌体阳性克隆
        1.2.7 对获取序列的生物信息学分析
2 结果
    2.1 噬菌体肽库的筛选与富集
    2.2 sFcγRⅡb与噬菌体结合活性的鉴定
    2.3 单链噬菌体DNA的纯化
    2.4 噬菌体DNA序列分析
    2.5 ELISA法鉴定噬菌体单克隆与sFcγRⅡb蛋白的亲和力作用
    2.6 对获取序列的生物信息学分析结果
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]人可溶型FcγRIIb的制备及其功能初步研究[J]. 张雷,曹秀琴,杨志伟.  细胞与分子免疫学杂志. 2012(09)
[2]脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白结合肽序列的亲和筛选[J]. 曹虹,林琳,刘北一,陈丽丹,杨军,贡树基,李明.  微生物学通报. 2006(05)
[3]人膀胱癌P-糖蛋白结合肽的筛选[J]. 王祥卫,郭应禄,张立新,杨唐俊,那彦群,叶刚,杨清浩.  中华泌尿外科杂志. 2003(12)



本文编号：3477650