人类尿苷胞苷激酶基因的功能研究

发布时间：2021-11-08 01:21

　　在本论文的第一章中主要是对人类尿苷胞苷激酶（UCK,EC 2.7.1.48）基因进行的一系列研究。UCK 是能将尿苷和胞苷磷酸化成一磷酸尿苷和一磷酸胞苷的嘧啶核苷激酶,本实验室克隆到的 UCK 基因表达后经活性检测具有磷酸化胞苷的作用,并发现该基因定位在细胞质中发挥它的生理作用。 UCK 在 16 种人的组织中的 mRNA 表达谱表明,这个基因广泛分布在多个组织中,其中肝脏、睾丸、心脏中表达较为丰富。Northern Blot 方法检测了 UCK 在 6 对肝癌和癌旁组织中的表达情况,并用半定量 RT-PCR 方法检测另外 30 对肝癌及癌旁组织 UCK 的表达丰度。结果显示,UCK 在肝癌组织中比癌旁组织中的表达量明显升高。原核表达并纯化UCK 蛋白,并以重组蛋白为抗原制备了兔源的多克隆抗体,用它进行肝癌及癌旁组织的表达情况及免疫组化的研究,结果显示,蛋白水平上,UCK 在肝癌组织中呈显著上调表达趋势。通过在不同发育阶段的大鼠中检测 UCK 的表达丰度,显示 UCK 在大鼠胚胎期的表达量很高,随着出生以后细胞增殖速度的减慢,表达量逐渐下降。UCK 有望成为显示肝癌细胞增殖速度的一... 

【文章来源】：复旦大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：92 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

UCK基因编码的多肽的氨基酸疏水性分析

学位论文rthern 杂交条带和 PCR 扩增产物的电泳条带进行剂量扫描分析，上调、瘤组织的表达量分别是其相应的癌旁组织的 1.5 倍以上和 0.75 倍以对肝癌和癌旁组织中的 Northern 杂交结果和 30 对肝癌及癌旁组织的总-PCR 的结果用直方图显示（图 12），36 对肝癌及癌旁组织中有 6 对呈表达量基本一致，其余 27 对的肝癌组织中 UCK 的表达均呈上调。基因在大部分肝癌组织中均呈上调表达趋势，在某些肝癌组织中的表与不同的肝癌的病理类型及分化的不同状态有关。

复旦大学博士学位论文预 测 ， 我 们 发 现 在 TCP10L 的 氨 基 酸 序 列 的 中 部 有 一 个 亮 氨 酸 拉 链 结 构(http://www.dkfz-heidelberg.de/tbi/services/2zip)[4]，从 72 位到 96 位共跨 25 个氨基酸，每7 个氨基酸重复出现一次亮氨酸残基。将推导蛋白的结构和一些已知的不同物种（人，鱼，酵母，烟草）的含有亮氨酸拉链的蛋白进行比较发现，这个预测的结构是可信的（图 1），而且，不同的蛋白中亮氨酸残基的数目各不相同，可以从 4 个到 6 个不等。在某些蛋白中，亮氨酸残基可以被 Met 或 Ile 或 Val 所取代，如 MafK 蛋白中，亮氨酸拉链结构中的第三个亮氨酸残基就由蛋氨酸取代。

【参考文献】：
硕士论文
[1]番木瓜果实成熟过程中差异表达基因的鉴定[D]. 谭昕.海南大学 2010



本文编号：3482716