兔牙髓细胞体外增殖及鉴定的实验研究

发布时间：2017-05-09 05:53

  本文关键词：兔牙髓细胞体外增殖及鉴定的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：体外分离培养兔牙髓细胞，研究兔牙髓细胞体外增殖特性及表面标志物的鉴定。方法：酶解组织块法培养兔牙髓原代细胞，有限稀释化克隆培养兔传代细胞，显微镜下观察原代细胞及传代细胞形态变化。取第3-6代细胞进行细胞活率的检测。取2代细胞进行细胞克隆计数。取第2、4、6、8、10代细胞绘制生长曲线。流式细胞仪对第2、4、6、8、10代细胞进行细胞周期的检测。取第2代细胞进行牙髓干细胞表面标志物vimentin、CD44、osteonectin、DSP的鉴定。结果：采用酶解组织块法培养的兔原代牙髓细胞、有限稀释化克隆培养的兔牙髓细胞形态学无明显差异。从第3代到第6代细胞活率细胞数比分别为：94.7%、95.8%、95.2%、95.3%。兔牙髓细胞克隆形成率为8-26个/2000个细胞。不同代细胞之间增殖率有差异，LSD-t检验示第2、4和6代DPCs间无统计学差异，第8代和10代DPCs与其他各代细胞之间的差异均有统计学意义。随着细胞传代，s期细胞比例增加。LSD-t检验示第2、4和6代DPCs的各期细胞比例无统计学差异(P＞0.05)，第8和10代DPCs与其他各代细胞之间均有统计学差异(P＜0.05)。牙髓干细胞表面标志物vimentin、CD44、osteonectin、DSP均为阳性。结论：体外分离培养的兔牙髓细胞具有较强的增殖活性、免疫细胞化学vimentin、CD44、osteonectin、DSP均为阳性表达，，证实兔牙髓细胞可分离培养出牙髓干细胞，为牙组织工程提供了新型种子细胞。
【关键词】：兔 牙髓细胞 体外增殖 鉴定
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 摘要8-9
• ABSTRACT9-10
• 前言10-12
• 内容与方法12-18
• 1. 研究对象及目的12
• 2. 主要试剂、仪器与试剂的配制12
• 2.1 主要试剂及仪器12
• 2.2 试剂的配制12
• 3. 兔牙髓细胞的分离、培养、传代、冻存12-14
• 3.1 兔牙髓细胞原代分离培养12-13
• 3.2 兔牙髓细胞的传代培养13
• 3.3 兔牙髓细胞的冻存与复苏13-14
• 4. 兔牙髓细胞生长动力学研究与鉴定14-16
• 4.1 细胞生长状况和形态观察14
• 4.2 细胞活率的计数14
• 4.3 细胞克隆形成率14
• 4.4 细胞生长曲线的测14
• 4.5 细胞周期的测定14
• 4.6 免疫细胞化学鉴定干细胞表面抗原14-16
• 5. 质量控制16-17
• 5.1 污染控制16-17
• 5.2 操作控制17
• 6. 统计学分析17-18
• 结果18-21
• 讨论21-26
• 小结26-27
• 致谢27-28
• 参考文献28-34
• 附录34-37
• 综述37-42
• 参考文献39-42
• 攻读硕士期间发表的文章42-43
• 导师评阅表43

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：351883