细胞治疗生长板损伤的研究

发布时间：2021-12-22 12:55

　　目的建立一种简单可靠的软骨细胞体外分离和纯化的方法。方法将2只幼龄新西兰兔心脏空气栓塞处死后,无菌操作下取得髂嵴部位的软骨块,修剪成1～2mm2组织块,经0.1%透明质酸酶、0.25%胰蛋白酶和0.1%Ⅱ型胶原蛋白酶三步法消化滤过后获得软骨细胞悬液,再经台盼蓝染色检测活细胞存活率后,接种到含10%胎牛血清（fetal bovine serum, FBS）细胞培养液的培养瓶中进行原代培养。结果取材兔髂嵴软骨经三步酶消化法后可获得多量的单个软骨细胞,具有良好的细胞活性。结论此方法是一种简单可靠的软骨细胞分离纯化方法,可进一步通过原代培养扩增后用于软骨或生长板损伤修复的各种基础研究。目的建立一种简便可靠的软骨细胞体外原代培养的方法。方法将2只幼龄新西兰兔心脏空气栓塞处死后,无菌操作下取得髂嵴部位的软骨块,修剪成1～2mm2组织块,经0.1%透明质酸酶、0.25%胰蛋白酶和0.1%Ⅱ型胶原蛋白酶三步法消化滤过后获得软骨细胞悬液,接种到含10%FBS细胞培养液的培养瓶和培养板中进行原代培养。倒置相差显微镜下观察软骨细胞生长状态,软骨细胞计数法绘制生长曲线,甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色和... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：92 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
前言
Preface
摘要
Abstract
第一部分 兔髂嵴软骨细胞分离及提纯的实验研究
    引言
    材料
    方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分 兔髂嵴软骨细胞原代培养及鉴定的实验研究
    引言
    材料
    方法
    结果
    讨论
    结论
    附图一
    参考文献
第三部分 兔胫骨近端生长板损伤模型构建的实验研究
    引言
    材料
    方法
    结果
    讨论
    结论
    附图二
    参考文献
综述一 生长板形态生理学的研究进展
    参考文献
综述二 骨骺损伤的研究进展
    参考文献
综述三 软骨组织工程学的研究进展
    参考文献
攻读学位期间以第一作者发表论文
缩略语
致谢



本文编号：3546418