检测黑猩猩腺病毒68型抗原的双抗体夹心ELISA的建立

发布时间：2021-12-25 07:38

　　目的 建立定量黑猩猩腺病毒68型（chimpanzee adenovirus type 68,AdC68）含量的双抗体夹心ELISA,并验证其可行性。方法 用表达绿色荧光蛋白（green fluorescence protein,GFP）的非复制型AdC68（AdC68GFP）感染HEK293细胞,收获病变细胞并进行超速离心纯化AdC68GFP。用纯化AdC68GFP免疫家兔制备抗AdC68GFP抗体。以抗AdC68GFP抗体为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的抗腺病毒HEXON IgG为酶标抗体,建立双抗体夹心ELISA,确定该法的线性范围,并验证该法的准确度、精密度、专属性和适用性。结果 纯化AdC68GFP的蛋白浓度为38.8 μg/ml,其中HEK293细胞蛋白浓度低于0.3 μg/ml。双抗体夹心ELISA的最适包被抗体和酶标抗体浓度分别为1∶50和1∶500。该法的线性范围为0.06～3.88 μg/ml,线性相关系数为0.999 6。高、低浓度AdC68GFP样品的回收率分别为93.17%和94.33%,变异系数分别为6.72%和3.44%。该法可特异性检测AdC68GFP抗... 

【文章来源】：国际生物制品学杂志. 2019,42(01)

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本文编号：3552055