长春地区EV71的分离鉴定及疏清颗粒的抗病毒药效学研究

发布时间：2017-05-10 22:03

  本文关键词：长春地区EV71的分离鉴定及疏清颗粒的抗病毒药效学研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：肠道病毒71型(Enterovirus71，EV71)归属于小RNA病毒科肠道病毒属，为单正链RNA病毒。EV71是引起手足口病的最主要病原体之一，致病性强、致死率高。目前，手足口病已成为严重危害我国少年儿童的重要疾病，在中国被列为丙类传染病。虽然手足口病已受到卫生部门的高度关注，但由于尚缺乏疫苗及有效的抗EV71药物，时常会有手足口病的局部爆发。吉林省长春地区2010年-2012年，每年都有手足口病散发病例，但尚未见针对这些病例的EV71病原学和药物的抗EV71研究。传统中药具有价格低廉、广谱抗病毒等优点，以疏清颗粒为代表的抗病毒中药在临床应用中被发现有治疗手足口病的作用，研究其抗病毒学药效学作用，解释其抗病毒机理将为手足口病的治疗做出重要贡献。因此，研究中药抗病毒药物或可成为对抗EV71病毒的新方法。 与长春市疾病预防控制中心合作，于2011年共采集到手足口病疑似病例咽拭子、粪便和疱疹液等样本50份，经中国疾病预防控制中心推荐的EV71RNA检测试剂盒（荧光PCR法）检测，，检出EV71阳性标本5份。将EV71阳性标本进行病毒的分离和鉴定：RD细胞分离培养，接种标本后均出现明显的细胞病变效应（CPE）,具体表现为RD细胞形态逐渐变圆，体积缩小，排列较为分散，胞浆内颗粒增加，折光性增强，从培养瓶上脱落。提取病毒RNA，荧光PCR法结果显示5株病毒均表达出阳性信号，而RT-PCR结果显示只有1份样本（EV71长春2011株，EV71CC2011）出现特异性条带，阳性率为20%。测定CC2011EV71病毒滴度为10~(-6.32)TCID50/ml。疏清颗粒抗EV71CC2011药效学结果为：抑制50％细胞生长的药物的浓度（CC50）为50.00±0.39mg.ml~(-1)；抑制EV71增殖的半数有效浓度（IC50）为0.136±0.022g·L~(-1)。 本研究成功地从长春地区感染EV71患儿体内分离出1株EV71临床株，命名为EV71CC2011。疏清颗粒抗病毒药效学研究结果显示，该药物具有毒性小，抗病毒作用强等优点，且机制研究证实抗EV71作用与抑制EV71的吸附有关。
【关键词】：EV71 病毒分离培养 疏清颗粒 抗病毒药效学
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R373.2;R285
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 英文缩写词表8-9
• 第1章 绪论9-14
• 1.1 手足口病概述9
• 1.2 手足口病流行病学9
• 1.3 手足口病诊断9-10
• 1.4 EV71 病原学10-11
• 1.5 EV71 病毒复制与感染：11
• 1.6 EV71 的预防11
• 1.7 EV71 的治疗11-12
• 1.8 传统中药的抗病毒作用12-14
• 第2章 实验研究14-25
• 2.1 EV71 的病原学研究14-21
• 2.2 药物抗 EV71 体外研究21-22
• 2.3 结果22-25
• 第3章 讨论25-29
• 3.1 EV71 的流行病学25
• 3.2 EV71 分离情况分析25
• 3.3 EV71 抗病毒药物25-27
• 3.4 药物的抗病毒作用27-29
• 第4章 结论29-30
• 参考文献30-33
• 致谢33

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