小鼠嗅皮层不同类神经元功能可塑性在联合式学习记忆中的作用

发布时间：2017-05-11 04:03

  本文关键词：小鼠嗅皮层不同类神经元功能可塑性在联合式学习记忆中的作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：建立小鼠联合式学习记忆的动物模型，通过T迷宫实验验证信息提取是否具有互为性，采用电生理实验方法，研究小鼠嗅皮层谷氨酸能神经元和GABA能神经元内在特性和突触传递效应的变化。 方法：1．条件反射模型的建立：选择出生后10天的C57BL-6-gfp小鼠，以乙酸丁酯作为气味源的无关刺激，经过训练10天后变为条件刺激，非条件刺激是5Hz的触须触觉刺激，建立小鼠触须触觉和嗅觉的条件反射动物模型。 2．行为学实验：实验分为四组：空白对照组、嗅觉训练组、触觉训练组、联合训练组，应用T迷宫检测小鼠嗅觉功能变化，实验中给予小鼠5Hz的触须触觉刺激，小鼠回避乙酸丁酯的概率作为鉴别其嗅觉功能上调的指标。 3．膜片钳电生理实验：实验分为联合训练和空白对照两组。取模型建立后小鼠和空白对照组小鼠，用异氟烷吸入麻醉，迅速将大脑分离，做冠状切片（400μm），然后将脑片置于氧合的人工脑脊液(ASCF)中，25C下孵育1-2小时后转移至灌流槽，31C下对脑片进行灌流；采用IR-DIC光学显微镜(Nikon E600FN)荧光显微镜定位大脑嗅皮层谷氨酸能神经元和GABA能神经元；运用Axoclamp-200B放大器，电流钳和电压钳模式全细胞记录方法研究小鼠大脑嗅皮层谷氨酸能神经元和GABA能神经元内在特性（ARP；Vts；Vr；Input-Output；ISI）以及神经元突触传递效应（sEPSC；sIPSC）的变化，数据输入Clampex10.1进行处理分析。 结果：1.行为学结果：（1）仅受嗅觉训练的小鼠实验中回避乙酸丁酯的概率高于空白对照组(P0.05)。（2）受触须触觉训练的小鼠实验中回避乙酸丁酯的概率与空白对照组比较无明显差异(P0.05)。（3）小鼠在接受触须-嗅觉联合训练10天后能建立起以乙酸丁酯气味刺激为条件刺激的条件反射。在给予非条件刺激时，小鼠回避乙酸丁酯的概率明显高于空白对照组(P0.01)，且与嗅觉训练组相比有显著性差异。 2.膜片钳实验结果：（1）电流钳模式实验结果发现，与空白对照组相比，受触觉-嗅觉联合训练的小鼠其谷氨酸能神经元群集发放动作电位的发放容量显著增加，动作电位间距ISI缩短(P0.05)，阈电位(Vts)降低(P0.05)，绝对不应期缩短（P0.05）,单位时间内发放动作电位的个数（Input and Output）增加(P0.05)。GABA能神经元的群集发放动作电位的发放容量显著降低，动作电位间距ISI延长(P0.05)，阈电位(Vts)升高(P0.05)，绝对不应期延长（P0.05）,单位时间内发放动作电位的个数（Input and Output）减少(P0.05)（2）电压钳模式实验结果发现，受触觉-嗅觉联合训练的小鼠与空白对照组相比，谷氨酸能神经元的自发性兴奋性突触后电流sEPSCs的电流间距缩短（P0.05），电流幅度增加(P0.05)，自发性抑制性突触后电流sIPSCs的电流间距延长（P0.05），电流幅度减小(P0.05)。GABA能神经元的自发性兴奋性突触后电流sEPSCs的电流间距延长（P0.05），电流幅度减小(P0.05)。 结论：1.小鼠受到重复嗅觉刺激后敏感性增加，可能发生了易化性的可塑性变化。 2.小鼠在受到联合训练后，，形成了联合记忆，在给予非条件刺激时，小鼠回避乙酸丁酯的概率明显省高，这说明联合式学习记忆中信息提取具有互为性。3.嗅皮层谷氨酸能神经元功能上调和GABA能神经元功能下调导致联合训练组的小鼠嗅觉功能增强。
【关键词】：联合式学习记忆 条件反射 嗅皮层 谷氨酸能神经元 GABA能神经元 T迷宫 全细胞记录
【学位授予单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R338.1
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 引言9-11
• 材料与方法11-17
• 结果17-36
• 讨论36-40
• 结论40-41
• 参考文献41-43
• 致谢43-44
• 附录 A44-45
• 附录 B45-47
• 附录 C47-48
• 附录 D48-55
• 参考文献53-55

【参考文献】

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本文编号：356180