化学致癌剂4-NQO饮水法诱导小鼠口腔鳞癌模型的建立

发布时间：2022-01-02 06:25

　　目的:使用化学致癌剂4-硝基喹啉-1-氧化物（4-nitro-quinoline 1-oxide,4-NQO）诱导并建立C57BL/6小鼠口腔鳞癌病变模型。方法:将4-NQO加入小鼠饮水,观察小鼠口腔黏膜的变化。于第12、16、20、24周处死,采集病变组织的样本,确定病变性质,并分离、培养肿瘤细胞。结果:实验组小鼠在16周后口腔黏膜有明显的外生性肿物发生,直径约0.2 mm。小鼠口腔黏膜肿物H-E染色结果显示,肿物呈外生性或浸润性生长,可见角化珠和明显的核分裂象。细胞呈多边形,贴壁牢固,CK、Ki-67染色阳性,表明此细胞为鳞癌细胞。结论:该模型诱导过程与人口腔鳞癌发病过程相似,是理想的研究口腔鳞癌发生、发展机制的动物模型。 

【文章来源】：中国口腔颌面外科杂志. 2019,17(04)

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

JC1细胞在正常培养下的凋亡情况Figure6ApoptoticrateofJC1cellsunderregularcultureconditions

殖标志物Ki-67染色均为阳性（图3）。2.3小鼠原代肿瘤细胞鉴定对小鼠原代肿瘤细胞进行特异性生物标志物检测，鉴定细胞来源。应用免疫荧光技术对小鼠原代肿瘤细胞进行染色，染色结果显示，上皮特异性生物标志物CK、上皮细胞间充质转化标志物Vimentin和增殖标志物Ki-67染色均为阳性（图4）。2.4小鼠原代肿瘤细胞增殖与迁移检测结果应用RCTA1.2软件对小鼠原代肿瘤细胞进行增殖与迁移的检测。应用RTCA1.2软件绘制细胞增殖曲线，曲线呈典型的“S”形，对数生长期大约在5～10h（图5A）。应用RTCA1.2软件进行细胞迁移检测，并绘制迁移曲线（图5B）。2.5小鼠原代肿瘤细胞凋亡检测结果应用流式细胞技术检测小鼠原代肿瘤细胞凋亡情况，结果显示，在常规DMEM培养基培养24h后，小鼠原代肿瘤细胞出现凋亡，且以晚期凋亡为主，占14.5%（Q2），早期凋亡占4.72%（Q3）。与其他口腔肿瘤细胞系的凋亡情况相近，也进一步证明了该细胞拥有口腔肿瘤细胞特性（图6）。3讨论本实验选用4-NQO作为诱癌剂，C57BL/6小鼠作为实验对象，成功构建了口腔鳞癌模型。诱导方法自然、简便，选用的小鼠亲缘性更接近于人类，诱导出的肿瘤能够较好地反映人类口腔鳞癌的生物学特征[10]。目前已有多种转基因或基因敲除小鼠，但用于图6JC1细胞在正常培养下的凋亡情况Figure6ApoptoticrateofJC1cellsunderregularcultureconditions图4JC1细胞的免疫荧光染色(比例尺为100μm)Figure4ImmunofluorescencestainingofJC1cells(scalebar=100μm)图3免疫组织化学CK、Ki-67?


本文编号：3563656