OGD对BBB体外模型中内皮细胞紧密连接蛋白及TEER的影响

发布时间：2017-05-11 20:04

  本文关键词：OGD对BBB体外模型中内皮细胞紧密连接蛋白及TEER的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:为了加深对血脑屏障的认识与进一步对其研究,构建血脑屏障的体外模型. 方法:原代分离培养SD大鼠乳鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascularendothelial cells, BMVEC),采用倒置显微镜观察细胞形态结构和生长规律,用免疫组化检测紧密连接蛋白claudin-5和ZO-1.内皮细胞与原代培养的星形胶质细胞在Transwell小室上建立BBB体外实验模型,用EVOM2观察跨膜电阻(Trans-epitheliumelectrical resistant,TEER)的动态变化,探讨血脑屏障模型建立以及特性. 结果:BMVEC培养至融合以后具有典型的“铺路石”样外观,claudin-5与Z0-1免疫组化证实细胞间形成紧密连接,单独培养BMVEC的TEER值为(161.5±1.96) Ω×cm2,共培养体外模型的TEER值为(185.4±3.25) Ω×cm~2. 结论:建立的BBB体外模型在形态学.电阻方面具备了BBB的基本特性,并且在星胶存在下共培养模型使BBB形态结构更完整. 目的:观察单纯培养BMEC及其与AS共培养两种模型条件下,缺氧-复氧时的变化 方法:分别对单独培养BMEC和AS与内皮共培养两个BBB两个体外模型.进行缺氧-复氧处理(缺氧4h,复氧1h,3h,6h,12h,24h),观察两者TEER值与紧密连接蛋白的变化. 结果:单独内皮细胞培养时,缺氧后电阻值有显著的下降,为(140.1±2.6) Ω*cm2 结论:缺氧后对单层BMEC的BBB模型有一定的破坏作用,在复氧后情况会有改善,但无法恢复到缺钱前状态.下一步进行共培养模型的实验.
【关键词】：脑微血管内皮细胞 共培养 血脑屏障 体外模型 TEER BBB MODEL OGD TEER ZO-1
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 全文缩略词表5-6
• 前言6-10
• 参考文献8-10
• 第一部分 体外血脑屏障的建立10-35
• 中文摘要10-11
• ABSTRACT11-12
• 引言12-13
• 材料与方法13-22
• 实验结果22-28
• 讨论28-32
• 参考文献32-35
• 第二部分 缺氧-复氧对 BBB 体外模型的影响35-44
• 中文摘要35
• 英文摘要35-36
• 引言36-37
• 材料与方法37-38
• 结果38-40
• 讨论40-42
• 参考文献42-44
• 综述一44-57
• 参考文献50-57
• 综述二57-63
• 参考文献60-63
• 致谢63

【共引文献】

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2 彭镜;尹飞;甘娜;张红媛;;体外血脑屏障模型的建立[J];中国当代儿科杂志;2005年06期

3 杨蓬勃;刘勇;;代谢型谷氨酸受体与神经发生关系的研究进展[J];神经损伤与功能重建;2009年04期

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本文编号：357945