MPTP诱导小鼠帕金森病模型中CLK1参与神经胶质细胞激活及神经毒性的研究

发布时间：2017-05-15 00:09

  本文关键词：MPTP诱导小鼠帕金森病模型中CLK1参与神经胶质细胞激活及神经毒性的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：研究clk1对MPTP诱导的小鼠帕金森病模型中神经元损伤以及胶质细胞激活的影响及其机制。 方法：野生型和clk1缺失型C57BL小鼠（Mclk1+/-)采用亚急性帕金森病模型（MPTP，30mg/kg，5天)，利用行为学检测，免疫组化和Western blotting方法分别检测MPTP模型后小鼠的行为学改变、脑内多巴胺能神经元损伤及多黑质部位胶质细胞激活情况；体外原代培养星型胶质细胞LPS/IFN-γ刺激，运用Real-timePCR，ELISA，NO assay方法检测星形胶质细胞激活情况，同时采用荧光探针DCFH-DA和JC-1分别检测原代星型胶质细胞内ROS的产生和线粒体膜电位的变化；利用LPS/IFN-γ刺激后的原代星型胶质细胞上清与神经元共培养，观察原代星型胶质细胞对神经元的神经毒性作用；最后利用Western blotting检测脑组织和体外培养星形胶质细胞内HIF-1α蛋白水平表达的变化。 结果：基础条件下，，与野生型比较，Mclk1+/-小鼠在行为学表现，多巴胺能神经元损伤，胶质细胞激活状态及胶质细胞线粒体功能方面无明显差异，但是在MPTP模型后，与野生型相比，Mclk1+/-小鼠爬杆时间显著延长，转棒运动时间显著缩短；免疫组织荧光化学检测发现中脑黑质部位TH阳性细胞数量显著减少以及邻近的GFAP和Iba1阳性细胞激活水平显著升高；体外原代培养的Mclk1+/-小鼠星型胶质细胞在LPS/IFN-γ刺激后，TNF-α，NO的释放和ROS生成显著增加；线粒体膜电位检测发现，LPS/IFN-γ刺激后，星型胶质细胞线粒体膜电位显著降低；胶质细胞条件培养基与神经元共培养实验发现，Mclk1+/-小鼠星型胶质细胞对神经元的损伤作用加剧；在炎症环境中，与野生型相比，clk1缺失可明显升高脑内和星形胶质细胞内HIF-1α的表达。 结论：1. clk1缺失小鼠对MPTP诱导中脑多巴胺能神经损伤更敏感。2.星型胶质细胞过度激活参与clk1缺失小鼠对MPTP诱导神经元损伤的敏感性。3. clk1缺失对MPTP诱导神经元损伤敏感性的增加和星型胶质细胞对炎症刺激反应性的增加可能与上调缺氧诱导因子HIF-1α有关。
【关键词】：帕金森病 星型胶质细胞 clk1 线粒体
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R742.5
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-13
• 实验材料和方法13-22
• 1.实验材料13-14
• 2.实验方法14-22
• 实验结果22-39
• 讨论39-44
• 结论44-45
• 参考文献45-49
• 附录一：综述49-56
• 参考文献54-56
• 附录二：英文缩写词56-57
• 致谢57-58

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王普清;孙圣刚;;黑质小胶质细胞主要组织相容性复合物Ⅱ的表达与帕金森病发生和进展的关系[J];国际神经病学神经外科学杂志;2009年02期

2 吕风月;赵咏梅;;星形胶质细胞在帕金森病发病机制中的作用[J];基础医学与临床;2008年05期

3 张琳;段德义;徐群渊;;神经元和胶质细胞的相互作用与帕金森病[J];解剖科学进展;2006年02期

4 陆利;白丽敏;孙红梅;洪庆涛;;电针血清对体外培养小胶质细胞活性的影响[J];解剖学杂志;2007年02期

5 张克忠;蒋雨平;;单胺氧化酶B抑制剂在治疗帕金森病中的研究[J];中国临床神经科学;2008年02期

6 殷剑;仲林;邹敬宇;汤宽妮;李淼;王璞;李s

本文编号：366507