脂肪干细胞高效率向神经祖细胞诱导分化的研究

发布时间：2017-05-15 07:40

  本文关键词：脂肪干细胞高效率向神经祖细胞诱导分化的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：【目的】研究大鼠脂肪干细胞高效率的向神经祖细胞诱导分化；携带绿色荧光蛋白（GFP）的慢病毒转染脂肪干细胞的效率和转染后的脂肪干细胞成骨，成脂诱导分化的能力。 【方法】大鼠脂肪干细胞在含20ng/ml EGF，20ng/ml FGF-2，2%B27的无血清培养基中培养，分两组：一组在不经任何处理（不含任何促进细胞贴壁的物质，如PLL等）的培养瓶中培养，一组在经处理（含促进细胞贴壁的物质）的培养瓶中培养。携带GFP的慢病毒转染脂肪干细胞，转染48小时后荧光显微镜下观察病毒转染后脂肪干细胞内绿色荧光蛋白的表达；油红O染色及茜素红染色鉴定病毒转染后脂肪干细胞的成脂，成骨诱导分化的能力。 【结果】在不经任何处理的培养瓶中培养时，大鼠脂肪干细胞能高效率的向神经祖细胞诱导分化，诱导分化的神经祖细胞呈神经球样的形态，高水平表达nestin。但在经处理的培养瓶中培养，只有很少的神经球出现。在没有生长因子（EGF,FGF-2）时，脂肪干细胞源的神经祖细胞能向神经元和神经胶质细胞分化，表达NeuN, GFAP。而nestin的表达下调。携带GFP的慢病毒转染脂肪干细胞48小时，荧光表达率可达85%；携带GFP的慢病毒转染的脂肪干细胞流式结果示：CD29表达99.8%，CD34表达0.3%，CD44表达0.3%，CD45表达48.7%；茜素红染色呈红色钙结节；油红O染色显示有大量脂滴。 【结论】在含20ng/ml EGF，20ng/ml FGF-2，2%B27的无血清培养基中培养，，且不含任何促细胞贴壁的因素下，脂肪干细胞能高效率的向神经祖细胞诱导分化。脂肪干细胞源的神经祖细胞为神经系统疾病的自体细胞移植治疗带来了希望。携带GFP的慢病毒能有效的转染脂肪干细胞，转染后的脂肪干细胞仍具有多向分化的能力。可携带目的基因进行基因治疗。
【关键词】：脂肪干细胞 神经祖细胞 不经处理的培养瓶 分化的神经细胞 携带GFP的慢病毒 转染 转染效率 多向分化
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 前言9-11
• 第一部分 SD大鼠脂肪干细胞高效率向神经祖细胞诱导分化的研究11-23
• 材料和方法11-17
• 结果17-21
• 讨论21-23
• 结论23
• 第二部分 携带GFP的慢病毒转染的SD大鼠脂肪干细胞多向分化潜能的研究23-32
• 材料和方法23-28
• 结果28-31
• 讨论31-32
• 结论32
• 参考文献32-37
• 综述37-51
• 参考文献43-51
• 附录51-52
• 致谢52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 钱晖,黄淑帧;成体干细胞的可塑性:横向分化还是细胞融合?[J];生命科学;2005年01期

2 李跃萍;宋丽萍;邱曙东;;慢病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用[J];现代肿瘤医学;2006年12期

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本文编号：367149