人类髓核细胞分离培养方法的优化探讨

发布时间：2017-05-15 22:07

  本文关键词：人类髓核细胞分离培养方法的优化探讨，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景：关于人类髓核细胞的分离培养方法不一，如何提高人类髓核细胞获得效率的问题尚未解决。 目的：优选人类髓核细胞制备的消化酶组分。 方法：无菌条件下取急性外伤后人类椎间盘髓核组织，按不同混合酶组分划分为2组，Ⅰ组成分为0.2%Ⅱ型胶原酶；Ⅱ组成分为先用0.25%胰酶消化30min，再用0.2%Ⅱ型胶原酶。每组再按消化时间分为2h，，4h，过夜3个亚组。最后重悬细胞终体积均定位2mL并计数，采用含胎牛血清的DMEM培养液体外培养细胞。 结果与结论：采用2种不同酶组分进行消化，发现消化时间2h及4h时Ⅱ组消化细胞更多，但无统计学意义(P0.05)。在孵育过夜组中，Ⅰ和Ⅱ组的细胞活性细胞率明显降低，差异有统计学意义(P 0.05)。在作用4h时，组织块消失，计数细胞数量最多，提示0.2%Ⅱ型胶原酶、消化人类髓核组织4h为获取人类髓核细胞的最佳条件。
【关键词】：人类 髓核细胞 Ⅱ型胶原酶 胰酶 消化 MTT
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329
【目录】：

• 摘要4-5
• 英文缩略词表5-7
• 0 引言7-9
• 1 对象和方法9-13
• 设计9
• 时间及地点9
• 材料9
• 纳入标准9-10
• 主要试剂及仪器10
• 方法10-11
• 酶处理及分组11-12
• 细胞计数12
• 细胞培养及传代12
• 细胞增殖能力检测12-13
• 主要观察指标13
• 统计学分析13
• 2 结果13-16
• 2.1 不同组分酶分离细胞的数量13-14
• 2.2 不同组分酶对细胞存活率的影响14-15
• 2.3 不同组分酶液对细胞增殖能力的影响15-16
• 3 讨论16-18
• 参考文献18-21
• 综述21-28
• 参考文献24-28
• 致谢28

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

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本文编号：369001