脾脏巨噬细胞的极化在大鼠热射病模型中的研究

发布时间：2017-05-16 09:02

  本文关键词：脾脏巨噬细胞的极化在大鼠热射病模型中的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的 通过学习、借鉴国内外学者对热射病动物模型的研究，结合本课题所能提供的实验条件及技术水平构建符合本实验要求的大鼠热射病模型。在热射病的病生机制研究中，内环境的炎性细胞因子的扩大反应占有较大的地位，巨噬细胞作为机体内免疫细胞的一种，介导着体内的炎性反应过程，通过分离、培养巨噬细胞，研究与其极化有关的iNOS、ArgⅠ两种因子在热应激处理后不同时间点的变化，进一步揭示巨噬细胞极化与热射病大鼠两者之间的关系，为临床治疗热射病提供新的靶点。 方法 经改良处理的可控式恒温箱控制热暴露环境的温度、湿度、暴露的时间，借鉴国内外学者热射病动物模型的研究进展，采用温度为40℃,湿度为60%的热暴露处理，达到热射病动物模型的诊断标准。通过采用实时定量PCR、Western Blot两种实验方法检测热处理即刻、1天、2天、3天、7天和对照组共6个点的大鼠脾脏巨噬细胞细胞表面标志物(iNOS、ArgⅠ)表达量的变化，来判定热应激发生后不同时间点巨噬细胞的极化方向。 结果 将大鼠放置于温度为40℃、湿度60%的热应激环境中处理后，构建成功的符合本课题要求的大鼠热射病模型。无菌操作取大鼠脾脏组织，经分离、纯化等无菌操作后获得数量较多的合格的大鼠脾脏巨噬细胞。实时定量PCR、Western Blot两种实验方法检测热处理后各时间点的实验指标与对照组相比，iNOS除7天组无意义(P0.05)，余各组与对照组比有统计学意义(P0.05)，但测得结果均小于对照组，，表示实验组未出现M1型巨噬细胞极化。ArgⅠ在各点的数据有统计学意义(P0.05)，在1天组ArgⅠ的含量逐渐升高，且高于同组iNOS表达量，提示在1天组后细胞向M2型方向转变，起到保护机体的作用。 结论 在热射病的病理生理学变化的研究中，体温调节中枢-下丘脑的功能紊乱、机体外热环境对细胞的直接热损伤作用、脂质氧化应激反应、内环境炎性细胞因子扩大级联反应等都参与其中。其中炎性反应在热射病的病理机制中发挥重大的作用，巨噬细胞作为机体的重要的免疫细胞和抗原提呈细胞在机体的免疫反应中发挥重大作用，在遭受到外界环境的应激性刺激后能够迅速的做出反应，以降低机体内环境的紊乱。既往研究表明，机体内巨噬细胞的极化发生与炎性相关疾病有极大的相关性。通过检测热应激处理后大鼠脾脏巨噬细胞的极化状态的发展变化及方向为热射病的病理发病机制提供新的研究方向，进而为热射病的临床诊断、预防治疗提供新的治疗措施。
【关键词】：热射病模型 脾脏 巨噬细胞的极化 iNOS ArgⅠ
【学位授予单位】：泰山医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R-332;R594.1
【目录】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 符号说明9-10
• 前言10-13
• 第一部分13-18
• 实验动物及材料14-15
• 结果15-16
• 讨论16-17
• 结论17-18
• 第二部分18-29
• 实验动物及材料19-25
• 实验结果25-27
• 讨论27-28
• 结论28-29
• 第三部分29-50
• 实验材料及步骤30-43
• 实验结果43-46
• 讨论及结果分析46-49
• 结论49-50
• 小结50-51
• 参考文献51-54
• 综述54-61
• 参考文献59-61
• 致谢61

【参考文献】

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1 林晓静;过热复合脂多糖致热射病大鼠动物模型多器官急性损伤的实验研究[D];南方医科大学;2009年

2 黄长文;轻度热应激大鼠脾脏巨噬细胞免疫功能的研究[D];南昌大学;2009年

3 吴士文;热射病中枢神经系统损害的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年

  本文关键词：脾脏巨噬细胞的极化在大鼠热射病模型中的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：370379