幽门螺杆菌的培养方法及其在人工模拟环境中生存状况的研究
发布时间：2017-05-16 13:00
本文关键词：幽门螺杆菌的培养方法及其在人工模拟环境中生存状况的研究，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：幽门螺杆菌（简称Hp）是慢性胃炎的致病菌，与消化性溃疡和胃癌的发生密切相关，然而对于其传播途径的研究还不是很清楚。近年来提出受污染的水和食物可能作为载体传播幽门螺杆菌，但缺乏有力证据支持，仍不清楚其在环境中的生存情况。本研究拟用烛缸法培养幽门螺杆菌（NCTC11637），并选出最适培养基；将幽门螺杆菌接种到人工模拟的四种实验室环境中，观察幽门螺杆菌在不同环境中的生存状况。 第一部分：幽门螺杆菌培养方法的建立和培养基的比较 目的：建立幽门螺杆菌的实验室培养方法，并选出该实验条件下最优的培养基。 方法：采用烛缸法对幽门螺杆菌进行复苏，对菌种进行鉴定并保存。将相同菌量的幽门螺杆菌接种到不同培养基上，培养5天后，检测并计算细菌数量，选出本实验最优的培养基。并将不同稀释度菌液接种到最优培养基上，观察其培养效果。 结果：本实验采用烛缸法成功复苏幽门螺杆菌，鉴定为幽门螺杆菌阳性。四种固体培养基上幽门螺杆菌生长情况存在差异，本实验最优的培养基为添加7%新生牛血清的布氏琼脂，有较好的分离培养效果。 结论：本实验室采用烛缸法成功培养复苏幽门螺杆菌；在该条件下最优的培养基是添加7%新生牛血清的布氏琼脂，有较好的培养效果，能够用于下一步实验从环境样本中分离培养幽门螺杆菌。 第二部分：幽门螺杆菌在人工模拟环境中生存状况的研究 目的：研究幽门螺杆菌在不同环境中的生存状况。 方法：实验室模拟纯水、牛奶、猪肉末和胡萝卜四种环境样本，将幽门螺杆菌接种到25ml(g)样本中使菌液浓度约为106cfu/ml(g)。样品分别放置于室温和4℃，在不同时点采样从样品中分离培养幽门螺杆菌，并染色观察其生存状况。 结果：幽门螺杆菌在四种模拟的环境中均不能生长繁殖，仅能存活一段时间，一段时间后无法分离。幽门螺杆菌在4℃环境中的存活时间长于室温，显微镜下观察细菌形态逐渐由杆状转变成圆球体。比较不同环境介质，幽门螺杆菌在牛奶中的存活时间最长，4℃超过10天，室温超过6天。在猪肉末中的存活时间，4℃中超过6天，室温能存活3天以上。幽门螺杆菌在4℃水中存活超过5天，而2天后就不能从室温的水中分离。在胡萝卜样本中的存活时间是四种环境中最短，4℃和室温都仅能存活数小时，一天后均不能从胡萝卜样本中分离培养出幽门螺杆菌。 结论：幽门螺杆菌在环境中不能生长繁殖，仅能存活一段时间。显微镜下观察幽门螺杆菌逐渐转变成不能培养的圆球体。在环境温度和菌液浓度相似的条件下，，幽门螺杆菌在牛奶中生存时间较长，故牛奶可能是幽门螺杆菌传播的重要媒介，猪肉末、水等其他环境介质在传播中发挥的作用也不容忽视。
【关键词】：幽门螺杆菌 烛缸法 培养基 人工模拟环境 生存状态 传播
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R378.2
【目录】：
- 摘要5-7
- Abstract7-9
- 前言9-12
- 第一部分 幽门螺杆菌实验室培养方法的建立12-29
- 1. 实验材料12-16
- 2. 实验方法16-21
- 3. 实验结果21-26
- 4. 讨论和小结26-29
- 第二部分 幽门螺杆菌在人工模拟环境介质中生存状况的研究29-38
- 1. 实验材料29-30
- 2. 实验方法30-32
- 3. 实验结果32-34
- 4. 讨论和小结34-38
- 总结38-39
- 参考文献39-43
- 综述43-54
- 参考文献50-54
- 附录54-55
- 致谢55
【参考文献】
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5 陈e
本文编号：370870
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