RELMβ在大鼠COPD模型肺组织的表达及与IL-8、IL-10和TNF-α的相关性

发布时间：2017-05-18 18:27

  本文关键词：RELMβ在大鼠COPD模型肺组织的表达及与IL-8、IL-10和TNF-α的相关性，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：通过被动吸入烟草烟雾法建立大鼠COPD模型，观察大鼠肺组织病理改变，研究RELMβ在大鼠COPD模型肺组织的表达，探讨其与炎症因子IL-8、IL-10及TNF-α的相关性，进一步探讨RELMβ在COPD发病机制中的作用。 方法：SPF级健康雄性Wistar大鼠70只（6周龄，体质量180±20g），按随机数字表法分为COPD模型组及正常对照组，每组各35只。按造模时间每组各分为2周、4周、8周、12周、16周、20周及24周七个亚组，每个亚组5只。采用被动吸入烟草烟雾法建立大鼠COPD模型。观察大鼠一般情况，根据造模时间点记录体质后处理大鼠，采集动脉血、肺组织及支气管肺泡灌洗液留做标本。肺组织病理切片行HE染色，观察病理学改变；ELISA法检测血清及支气管肺泡灌洗液（BLAF）中IL-8、IL-10及TNF-α浓度的动态变化；WesternBlot法检测大鼠肺组织匀浆中RELMβ蛋白的表达；免疫组化方法分析其在肺组织表达情况。数据运用SPSS13.0统计软件存储及分析，P0.05为差异有统计学意义。 结果： (1)COPD模型组大鼠较对照组体质增加缓慢，从第4w起至造模结束，体质明显低于对照组(P0.01)。 (2)正常对照组大鼠各时间点肺组织未见明显病理变化；COPD模型2w组肺组织未见明显病理变化，第4w组起可见支气管壁增厚，管腔内少许炎症细胞浸润；随造模时间延长，模型组大鼠气管壁逐渐增厚，管腔逐渐狭窄变形；至第16w组，模型组大鼠各级支气管慢性炎症明显，管腔明显狭窄，有气道重构和肺气肿形成；第20W组可见肺泡管、肺泡囊及肺泡扩大，部分融合形成肺大泡，伴行的血管壁明显增厚。 (3)Western blot结果显示，随着造模时间延长，RELMβ蛋白在模型组表达逐渐增强，其在同一时间点表达均强于对照组，并在第20-24w组达到峰值。免疫组化结果显示，RELMβ在正常对照组肺组织呈少量、散在表达，在COPD模型组肺组织中表达增加，主要表达于肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞及肺泡巨噬细胞等处，在细胞外基质沉积及平滑肌增生处可见少量表达。 (4)血清和BALF中IL-8、IL-10及TNF-α水平变化：1)血清中模型组IL-8浓度在第2w组与对照组相比差异无统计学意义，第4w组开始升高（P0.05），至第24w浓度较对照组明显升高，差异有统计学意义(P0.01)；BALF中模型组IL-8浓度在第2w、4w组与对照组差异无统计学意义（P0.05），在第8w、12w较对照组升高（P0.05），，第16-24w组较对照组显著升高（P0.01）。2）血清模型组IL-10的浓度在第2w、4w组较对照组无显著差异（P0.05），第8w组较对照组降低（P0.05），第12w-24w组较对照组明显降低（P0.01），差异有统计学意义；BALF模型组IL-10浓度在第2、4、8w组与对照差异无统计学意义(P0.05)，第12w组较对照组浓度下降，差异有统计学意义（P0.05），第16-20w组较对照组明显下降（P0.01）。3)血清中模型组TNF-α水平在第2w、4w组较对照组无显著差异，第8w组高于对照组（P0.05），第12-24w组较对照组明显升高(P0.01)，差异有统计学意义；BALF中模型组TNF-α浓度在第2w组较对照组无显著差异，第4w较对照组升高，（P0.05），8-24w组随造模时间延长而逐渐升高，差异有统计学意义(P0.01)。 (5)RELMβ在COPD模型组肺组织的表达与血清中IL-8、TNF-α浓度呈正相关（r分别＝0.926，0.819，P均0.05）；与BALF中IL-8、TNF-α浓度呈正相关（r分别＝0.817，0.931，P均0.05）；与血清及BALF中IL-10浓度呈负相关（r分别＝-0.891，-0.864，P均0.05） 结论：RELMβ蛋白在COPD模型组大鼠肺组织中表达较对照组明显升高，其表达水平与血清及BALF中IL-8、TNF-α表达呈正相关，与血清及BALF中IL-10浓度呈负相关，提示RELMβ作为一种炎症介质，参与COPD慢性炎症及气道重塑过程。
【关键词】：慢性阻塞性肺疾病 大鼠 抵抗素样分子β 白细胞介素-8 白细胞介素-10 肿瘤坏死因子-α
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R563;R-332
【目录】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-7
• 缩略语7-9
• 前言9-12
• 材料和方法12-21
• 1.1 实验材料和试剂12-13
• 1.2 研究对象和标本制备13-15
• 1.3 实验操作方法15-20
• 1.4 统计学分析20-21
• 结果21-32
• 2.1 实验动物一般情况比较21
• 2.2 肺组织病理改变21-22
• 2.3 血清及 BALF 中 IL-8 水平的动态变化22-24
• 2.4 血清及 BALF 中 TNF-α水平的动态变化24-26
• 2.5 血清及 BALF 中 IL-10 水平的动态变化26-28
• 2.6 Western Blot 检测 RELMβ蛋白的动态变化28
• 2.7 免疫组化结果28
• 2.8 变量间相关性分析28-32
• 讨论32-37
• 3.1 COPD 流行病学及发病机制32-33
• 3.2 RELMβ研究进展及在肺部疾病中的作用33-35
• 3.3 RELMβ与 COPD 炎症因子关系的探讨35
• 3.4 调控机制35-37
• 结论37-38
• 参考文献38-41
• 附录41-43
• 研究生期间发表论文情况43-44
• 致谢44

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 宋小莲;王昌惠;白冲;;脂多糖结合熏烟法和单纯熏烟法建立慢性阻塞性肺病大鼠模型的比较[J];第二军医大学学报;2010年03期

2 宋一平;崔德健;茅培英;梁延杰;彭瑞云;崔雪梅;王德文;;慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道重塑病理组织学表现和细胞外基质变化的研究[J];感染.炎症.修复;2000年01期

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4 周玉民;王辰;姚婉贞;陈萍;康健;黄绍光;陈宝元;王长征;倪殿涛;王小平;王大礼;刘升明;吕嘉春;郑劲平;钟南山;冉丕鑫;;职业接触粉尘和烟雾对慢性阻塞性肺疾病及呼吸道症状的影响[J];中国呼吸与危重监护杂志;2009年01期

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本文编号：376845