学习记忆中磷酸化的CREB在大鼠丘脑前核内的表达

发布时间：2017-05-19 11:18

  本文关键词：学习记忆中磷酸化的CREB在大鼠丘脑前核内的表达，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：丘脑前核（anterior thalamic nuclei，ATN）是背侧丘脑的重要组成部分，它由三个亚核组成，分别为丘脑前核背侧核（AD），丘脑前核腹侧核（AV）及丘脑前核内侧核(AM），其功能与空间学习记忆相关。磷酸化的环磷酸反应元件结合蛋白（P-CREB）作为一种重要的核转录因子在空间学习与记忆的过程中也发挥着非常重要的作用。 目的：本实验研究应用Morris水迷宫行为学实验和免疫组织化学技术，通过观察磷酸化的环磷酸反应元件结合蛋白在大鼠丘脑前核的表达和分布情况，从而进一步研究并阐述P-CREB与学习记忆的关系，进而为P-CREB参与大鼠丘脑前核的学习记忆提供更新颖前沿的资料。 方法：实验动物采用成年Wistar大鼠30只，雄性，，体重200-250g。进行为期5天的Morris水迷宫行为学实验后经乙醚及4%水合氯醛腹腔注射麻醉，固定大鼠，暴露大鼠心脏，将灌注针头经左心室插入至升主动脉进行灌注。灌注完毕立即取脑，置于4%多聚甲醛固定液中4°C过夜。次日使用震动切片机连续冠状切片，片厚30μm。使用anti-CREB抗体作为标记物，采用免疫组化SABC法染色，在光镜下观察P-CREB在学习记忆过程中在丘脑前核内的表达及分布情况，所有标本均采用同一套图像分析系统进行拍照及分析，所得数据应用SPSS19.0软件进行配对资料t检验。Morris水迷宫行为学实验中实验组不同时间逃避潜伏期比较采用单因素重复测量方差分析。 结果：1.Morris水迷宫行为学实验结果：实验组大鼠在经过为期4天的空间定位航行实验后，第2,3,4天的“逃避潜伏期”与第一天的“逃避潜伏期”比较有显著的缩短（P0.05），说明实验组大鼠具备一定的空间学习记忆能力，随着空间定位航行训练次数的增多，大鼠的空间学习能力将会提高，并且通过空间定位的学习成功建立了空间定位的学习记忆动物模型。 2．磷酸化的环磷酸反应元件结合蛋白免疫组织化学结果：在光镜下可以看到P-CREB的阳性表达位于细胞核内，主要呈圆形和椭圆形，并且在AV和AD区均有明显的阳性表达，实验组大鼠丘脑前核内P-CREB在AD和AV区免疫阳性产物平均光密度值与对照组大鼠丘脑前核AD和AV区免疫阳性产物平均光密度值有明显的统计学差异（P0.05）。实验组丘脑前背侧核与丘脑前腹侧核比较,两者间P-CREB阳性表达差异无统计学意义（P0.05）。 结论：在学习记忆过程中大鼠丘脑前核内有磷酸化的环磷酸反应元件结合蛋白的表达。
【关键词】：学习记忆 P-CREB 大鼠 丘脑前核 Morris水迷宫
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R322.8
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-13
• 材料与方法13-18
• 一、 实验材料13-14
• 1 实验动物13
• 2 主要仪器13
• 3 主要试剂13-14
• 二、实验方法14-18
• 1 Morris 水迷宫行为学实验14-15
• 2 实验动物灌注取材15-16
• 3 免疫组织化学16-17
• 4 图像处理17
• 5 统计学处理17-18
• 结果18-21
• 1 Morris 水迷宫18
• 2 大鼠丘脑前核 P-CREB 的免疫组化观察与图像分析18-21
• 附图21-24
• 讨论24-29
• 结论29-30
• 参考文献30-35
• 综述35-46
• 参考文献41-46
• 致谢46-47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 余瑞元,王燕峰,徐长法;CREB研究进展[J];中国生物工程杂志;2003年01期

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本文编号：378554