SIRT1在铜绿假单胞菌LPS诱导A549细胞凋亡中的作用研究

发布时间：2023-04-12 05:50

　　目的：铜绿假单胞菌属革兰氏阴性杆菌假单胞菌属,为条件致病菌,可产生多种致病因子,包括一些酶类及毒素,例如：脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)等,当机体免疫力低下时可引起严重的肺部感染。LPS为铜绿假单胞菌的致病因素之一,它在调节宿主和细菌之间起到关键性作用。研究表明LPS可以诱导A549细胞发生凋亡,并促进细胞内活性氧产生增多。文献报道,活性氧是细胞凋亡的原因之一,活性氧可引起氧化应激最终导致细胞凋亡。SIRT1是一种具有NAD+依赖的蛋白去乙酰化酶活性的多功能转录调节因子,它属于Sir2家族,对细胞的生存、凋亡、衰老等生理活动起着十分重要的调节作用。研究表明SIRT1是一种抑制细胞凋亡的因子,可通过对p53去乙酰化的调控从而抑制细胞凋亡。本研究通过建立LPS诱导A549细胞凋亡模型,来分析在此过程中,SIRT1在铜绿假单胞菌LPS诱导A549细胞凋亡中的作用并探讨活性氧在LPS诱导A549细胞凋亡中的作用。 方法：1.MTT方法检测LPS在不同浓度及不同时间对A549细胞活力的影响。2.用Western blot方法检测LPS在不同浓度及不同时间对A549细胞S...

【文章页数】：76 页

【学位级别】：博士

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目录
缩略词表
摘要
Abstract
前言
材料与方法
    一、主要材料、试剂与仪器设备
    二、试剂配制
    三、主要实验方法和分组
        3.1 A549细胞培养
        3.2 实验分组
        3.3 MTT检测A549细胞活力
        3.4 细胞内活性氧检测
        3.5 细胞凋亡检测
        3.6 细胞免疫荧光方法
        3.7 Western blot检测蛋白表达
    四、实验结果的统计学处理
结果
    一、LPS可降低A549细胞活力,呈时间及浓度依赖性
    二、SIRT1主要分布于A549细胞核内
    三、LPS对A549细胞SIRT1表达的影响
    四、SIRT1、p53及Bcl2参与了LPS诱导的A549细胞凋亡
    五、白黎声醇（Res)可通过上调A549细胞内SIRT1的表达抑制细胞的凋亡
    六、烟酷胺(NAM)可通过抑制A549细胞内SIRTl的表达促进细胞的调亡
    七、N-乙酰半胱氣酸（N-acety-L-cysteitre, NAC)可抑制活性氧的产生并减少A549细胞的凋亡
讨论
结论
参考文献
综述(一)
    参考文献
综述(二)
    参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3790562