鹰嘴豆芽素A对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌外排系统的抑制作用
发布时间：2017-05-20 12:26
本文关键词：鹰嘴豆芽素A对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌外排系统的抑制作用，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：【目的】MRSA外排系统是其对多种药物耐药性的主要原因,为此研究鹰嘴豆芽素A对MRSA外排系统的抑制作用。【方法】以MRSA41577为供试菌株,通过二倍稀释法、双平板法和荧光分光光度法测定鹰嘴豆芽素A对MRSA41577的抑制作用及其对外排系统的影响;通过RT-PCR检测加药前后MRSA41577外排蛋白norA的表达量;SDS-PAGE检测加药前后与MRSA41577外排相关蛋白的变化,并用液相色谱质谱仪进行鉴定确认。【结果】鹰嘴豆芽素A本身无抑菌活性,但鹰嘴豆芽素A和环丙沙星联合作用后,MRSA41577对环丙沙星的敏感性显著提高,其中40μg/mL的鹰嘴豆芽素A能使环丙沙星对MRSA41577的MIC从64μg/mL降低到8μg/mL,且作用强度与药物浓度呈正相关。经鹰嘴豆芽素A处理MRSA41577后,菌体内环丙沙星的蓄积量随着药物处理时间的增加而增加,在处理15min时与对照组相比,菌体内环丙沙星蓄积量增加了83%(P㩳0.01),与阳性对照利血平的作用效果相当。鹰嘴豆芽素A能降低MRSA41577的norA表达量,与对照组相比,鹰嘴豆芽素A和环丙沙星作用MRSA41577 16h后,norA的相对表达量降低了65%,其抑制效果优于阳性对照利血平的48%。SDS-PAGE电泳结果显示,鹰嘴豆芽素A作用MRSA4157716h后,与对照组相比菌体的蛋白谱带发生了明显的变化,其中与外排系统相关的蛋白除norA蛋白明显减少外,ABC转运体ATP结合蛋白也明显减少。【结论】鹰嘴豆芽素A是MRSA41577的外排泵抑制剂,其作用机制是通过降低MRSA41577菌体内norA基因的表达量,进而减少norA蛋白的表达量,来抑制MRSA41577对环丙沙星等药物的排出而恢复其对药物的敏感性。
【作者单位】： 辽宁师范大学生命科学学院 辽宁省生物技术与分子药物研发重点实验室;
【关键词】： 鹰嘴豆芽素A 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 norA基因 外排蛋白
【基金】：辽宁省教育厅科学研究一般项目(L2013412) 大连市科技计划项目(2013E13SF108)~~
【分类号】：Q935
【正文快照】： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是引起医院和社区感染的重要致病菌[1-2],它除对甲氧西林耐药外,对β-内酰胺类、大环内酯类、氨基糖苷类、四环素类、喹诺酮类等抗生素也均有不同程度的耐药 性[3]。目前研究结果表明,主动外排系
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本文编号：381646
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