ETS和C/EBP对载脂蛋白F转录调控机制的研究

发布时间：2024-02-18 04:03

　　目的：载脂蛋白F（apolipoprotein F，ApoF）是近些年发现的载脂蛋白，其血浆浓度与血脂异常密切相关，本课题主要是深入研究ETS和C/EBP调控载脂蛋白F基因表达的机制。 方法：1.将ApoF启动子区构建在PGL4载体上，2.通过pumbed基因数据库设计本课题先前已预测的潜在转录因子的表达框，并通过基因合成的方法构建相关转录因子表达克隆3.启动子分别与转录因子及其相应显性失活突变体共转染实验4.电泳迁移率检测和染色质免疫共沉淀从体内外验证反式作用因子和顺式作用元件的直接相互作用5.通过westernblot及realtime PCR检测人类不同组织来源细胞株的ApoF蛋白及mRNA表达水平6.通过westernblot检测人类不同组织来源细胞株的C/EBPα、C/EBPβ蛋白表达水平7.转录因子特异性siRNA实验8.从蛋白水平检测ETS-1、ETS-2、C/EBPα、ETS-1与C/EBPα、ETS-2与C/EBPα对ApoF是否具有促进作用9.免疫共沉淀实验检测转录因子之间的相互作用。 结果：1.成功构建PGL4-ApoF198荧光报告基因2.将C/EBP及HNF3...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
引言
材料和方法
结果
讨论
结论
参考文献
附录一 英文缩略词表
附录二 试剂配方
附录三 主要仪器设备
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3901865